多位点序列分型在食源性金黄色葡萄球菌分型中的应用研究
2013-09-12吕国平卫沛楠徐保红
微生物学杂志 2013年3期
吕国平,卫沛楠,徐保红,芦 飞
(石家庄市疾病预防控制中心,河北石家庄 050000)
金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus,简称金葡菌)可引起人和动物的机会性感染,食品受其污染的几率也很高,是引起食物中毒的一种重要病原菌[1]。随着食品卫生越来越受到重视,人们不仅关心食品金葡菌的污染问题,更关注金葡菌引起的食物中毒或其引起卫生事件的溯源问题。基因分型技术逐渐成为微生物学监控的重要手段,MLST技术是近年来才发展起来的一种新型分子分型方法,对细菌的溯源有重要意义,该方法具有分辨率高、数据可靠、重复性好、便于不同实验数据比较,有利于全球范围的分子流行病学数据标准化的优势[2]。本研究应用MLST对从各类食物样品中分离的18株金葡菌进行基因分型研究,了解本地区食源性金葡菌主要流行菌株的基因型特征,为进一步研究本地区食源性金葡菌所致食物中毒的分子流行病学调查提供实验室依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌株 18株从2012年各类食品样本中分离的金黄色葡萄球菌。
1.1.2 主要试剂和仪器 Baird-Parker琼脂培养基(北京陆桥),亚碲酸钾卵黄增菌液(美国BD公司),溶葡萄球菌酶(上海生工生物工程有限公司),基因组提取试剂盒(德国 QIAGEN公司),FRIOCELLⅢ型霉菌培养箱(德国MMM公司),PrimeSTARTM高保真DNA聚合酶(大连宝生物工程有限公司),基因扩增仪(美国MJ Research),Nanodrop2000微量分光光度计(美国 Thermo),QIAXCL毛细管电泳仪(德国 QIAGEN公司)。PCR引物委托上海生工公司进行合成。
1.2 方法
1.2.1 PCR模板的制备 从Baird-Parker琼脂平板上挑取单个典……
登录APP查看全文
