结核分枝杆菌融合抗原Rv3914－6His的原核表达、纯化与抗原性检测

2013-09-12蔡家麟廖万清

微生物学杂志 2013年3期

蔡家麟，潘欣*，王颖，陈敏，廖万清

(1.第二军医大学，上海 200433;2.上海交通大学基础医学院，上海 200025)

结核病(tuberculosis，TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，Mtb)感染引起的传染病，结核分枝杆菌通常感染并破坏肺以及淋巴系统，而中枢神经系统、循环系统、泌尿系统、骨骼、关节、甚至皮肤等其他器官系统亦可受感染。结核病是目前仅次于HIV的第二大传染病;中国是全世界第二大结核病高发国家，仅次于印度。因此，结核病的国内外防控形势非常严峻。控制结核病流行的关键在于找到灵敏度高、特异性强、便于基层医院广泛使用的诊断方法。本研究选择结核分枝杆菌 H37Rv菌株 Rv1908c、Rv0733、Rv0899、Rv1411c和Rv3914等5种结核分枝杆菌分泌性抗原作为血清学诊断抗原筛选对象。其中Rv1908c基因名为katG，抗原名为过氧化氢酶-过氧化物酶-过氧亚硝酸酶 T(catalase-peroxidaseperoxynitritase T)，分子量约80.57 ku，对分枝杆菌在巨噬细胞内存活有重要作用;Rv0733基因名为adk，抗原名为腺苷酸激酶，分子量约20.09 ku，对该菌在细胞内的核苷酸代谢发挥作用;Rv0899基因名为ompA，抗原名为外膜蛋白 A，分子量约33.54 ku，是维持细菌完整性的结构蛋白;Rv1411c基因名lprG，抗原名为保守脂蛋白，分子量约24.55 ku，功能未知;Rv3914基因名为trxC，抗原名为硫氧还蛋白，分子量约12.54 ku，可参与多种氧化还原反应。5种抗原经原核表达、纯化，包被酶标板，采用间接ELISA方法比较了活动期结核病患者组和健康对照组血清中分别与5种结核分枝杆菌抗原反应的 IgG水平，探讨了抗Rv1411c的IgG作为活动期结核病新的血清学标志物的可行性。