唐祎周，孙忠人，张 翀

(黑龙江中医药大学，黑龙江哈尔滨 150040)

脊髓损伤(spinal cord injury，SCI)是常见的中枢神经系统损伤。大量研究表明SCI后的继发性损伤才是导致其功能障碍的主要原因。继发性损伤早期具有可逆性［1］，后期则造成脊髓功能永久性丧失。细胞凋亡(apoptosis)是机体生长发育、细胞分化和病理状态中细胞自主性死亡过程。死亡受体活化和线粒体损伤途径是细胞内两条经典的凋亡途径［2］，内质网应激启动的凋亡途径是近年才发现的一种新的凋亡途径。内质网应激(endoplasmic reticulum stress，ERS)可诱导未折叠蛋白反应，其感受器为 Irel蛋白［3］。本研究通过观察脊髓损伤后细胞凋亡情况及损伤处IRE1蛋白表达的变化，探讨电针对内质网应激介导的细胞凋亡的影响及其相关机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物

健康雄性Sprague－Dawley(SD)大鼠132只，体重(200±20)g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。使用随机数字表随机分为假手术组、模型组、对照组、疏波组4组，每组分为8 h、3 d、7 d三个时相点，每个时相点11只。分笼饲养，室温保持在(22±2)℃，自由饮水进食，适应环境，保持正常的12 h白天和黑夜交替周期。

1.2 主要仪器和试剂

手术显微镜(四川科奥达)、moticam3000显微摄影成像系统(美国)、Bicinchoninic Acid Kit for Protein Determination(Sigma)SDS－PAGE凝胶配制试剂盒(Beyotime)、RNA 反转录试剂盒(Takara，日本)、Irea－1抗体(ADCAM，美国)。

1.3 动物模型的制备

大鼠用10%水合氯醛(0.4 ml/100 g)经腹腔进行麻醉，固定后备皮，常规消毒，以胸8棘突为中心，沿脊柱方向取一长约3.0 cm的切口，切开皮肤、肌肉，分离并显露棘突，游离附着于棘突两侧的骶棘肌，将胸8棘突椎板全部切除，保留硬脊膜。用改良式……