穴位埋线对慢性萎缩性胃炎大鼠Toll样受体4和核因子-κB表达的影响*
2013-09-08李素荷钟国新樊永磊黄志毅
陈 璐,李素荷,钟国新,樊永磊,张 璇,黄志毅
(广州中医药大学,广东广州 510405)
慢性萎缩性胃炎(CAG)是指不同病因引起的慢性胃黏膜萎缩性病变。Toll样受体(TLR)是一种跨膜受体蛋白,通过识别细菌、真菌、细胞坏死成分等内源性或外源性配体,参与炎症反应并促进和提高免疫应答[1]。研究已证实在胃黏膜感染Hp后,TLR4表达增加,从而使核因子-κB(NF-κB)活化,而过强的免疫反应是炎症发生的重要机制之一[2]。NF-κB是一类与DNA结合的二聚体蛋白,为细胞内重要的转录调控因子[3]。NF-κB激活后转位至细胞核内,通过与DNA相结合启动并调节炎症反应相关基因转录。TLR4/NF-κB信号介导了胃部疾病的炎症反应过程。本实验旨在探讨穴位埋线对TLR4/NF-κB信号传导通路的影响,从而更好地指导临床实践。
1 材料和方法
1.1 实验动物及分组
60只SPF级8周龄SD大鼠(由广东省医学实验动物中心提供,许可证号:SCXK粤2008-0002),雌雄各半,体重180~220 g,采用架式笼养,恒温(20±1)℃,湿度50% ~60%,光照黑暗各12 h交替,自动通风8~15次/h条件下饲养。采用随机数字表法将大鼠随机分为正常对照组、模型组、自然恢复组、埋线组,每组15只。
1.2 主要试剂及器械
试剂:甲基-硝基-亚硝基胍(MNNG,生产批号:GNGMH日本东京化成工业株式会社),兔抗鼠TLR4多克隆抗体 (生产批号:BA0299,美国Abcame),兔抗鼠NF-κB多克隆抗体(生产批号:BA0614,美国Abcame),SP试剂盒(生产批号:C0103,武汉博士德生物工程有限公司),DAB显色试剂盒(生产批号:ARl012,武汉博士德生物工程有限公司),10%中性缓冲福尔马林固定液(生产批号11011301,广州维格斯生物科技有限公司)。器械:①针具:6号一次性注射针头(浙江京环医疗用品有限公司生产),华佗牌30号1.5寸不锈钢毫针(苏州医疗用品厂);②埋植用羊肠线:0000号铬制羊肠线(上海浦东金环医疗用品有限公司)。……
