寻常型银屑病皮损处ASC和caspase-1的表达
2013-08-24杨闰平李恒进
胡 坚,杨闰平,李恒进,赵 华
解放军总医院 皮肤科,北京 100853
银屑病是一种慢性炎症性皮肤病,多被认为由T淋巴细胞介导,但近年来研究发现多种固有免疫细胞和成分也在银屑病的发病中起到了重要作用。其中凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein,ASC)和半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)是NLRP3(NOD-like receptor family pyrin domain containing 3)炎症小体的组成部分。NLRP3炎症小体作为一种固有免疫系统NOD样受体(nucleotide binding oligomerization domain-,NOD)家族的胞内模式识别受体,通过识别多种内源性和外源性危险信号,合成和释放IL-1β和IL-18参与炎症反应并启动T细胞的免疫反应[1-2]。以往研究发现,NLRP3炎症小体参与了类风湿性关节炎、2型糖尿病、克罗恩病等疾病的发生[3],而银屑病同样作为一种非感染性炎症性疾病,NLRP3炎症小体是否参与其发病研究尚少。我们采用免疫组化方法对寻常型银屑病皮损中ASC和caspase-1的表达进行了检测,并与正常人对照。
对象和方法
1 研究对象 2011年2月-2012年5月我科门诊确诊的寻常型银屑病30例,其中首次发病5例,复发25例,均为进展期,男18例,女12例,年龄23~54(40.45±9.58)岁,病程2个月~20年,银屑病皮损面积和严重程度指数评分为5.61~20.10(12.34±5.02)分,所有患者2个月内无系统用药,2周内未使用银屑病外用药物。正常对照20例,年龄、性别与银屑病患者匹配,为我科色痣患者切除时距离色痣边缘3 mm以外的周边正常组织。
2 免疫组化检测 小鼠ASC、caspase-1多克隆抗体购自美国Abcam公司。常规方法制作标本,2 μm厚度连续切片,Elivision免疫组化染色:高压锅加热修复,双氧水消除过氧化酶,分别滴加1∶100 ASC和1∶100 caspase-1一抗,4 ℃湿盒过夜后PBS洗3次,每次3 min,滴加二抗,室温静置20 min后PBS再洗3次,加三抗,操作步骤同前。……
