侯永微，纪小龙，王美娥辽宁医学院 病理学与病理生理学，辽宁锦州 00；武警总医院 病理科，北京 00039

原子力显微镜(atomic force microscope，AFM)在医学领域中的应用越来越广泛，并已在各系统的正常及病变的细胞膜形态的探索上取得了很多成果[1-2]。目前临床免疫组织化学过程中出现的假阳性、假阴性、共同表达、例外表达等问题的进一步解释亟需抗原及抗体高分辨率的成像。因此，抗体分子的成像也是AFM研究的热门内容，并可间接了解相应抗原的形态，为抗原-抗体结合提供直观的形态学基础。本文应用AFM观察常用的7种鼠抗人单克隆抗体的形态，初步探讨不同抗体形态的相对特异性。

材料和方法

1 试剂和仪器 近1个月内中杉金桥公司制备的7种鼠抗人单克隆抗体(广谱细胞角蛋白、波形蛋白、白细胞共同抗原、S100蛋白、细胞角蛋白7、Dog-1、甲状腺球蛋白)的工作液。ECLIPSE TE2000-U倒置相差显微镜(购自日本NIKON公司)；Nanoscope Ⅲa型原子力显微镜(购自Digital Instruments Inc，Santa Barbara，CA)，采用氮化硅(Si3N4)悬臂，SNL-10型针尖(contact模式)，微悬臂长85 μm，力常数2.5 N/m，探针针尖曲率半径为20~30 nm，X轴扫描256线。

2 制备扫描样本 先将载玻片(单头单面硅化黏附载玻片)用记号笔圈定直径为1.5 cm的圆形范围，将上述7种鼠抗人单克隆抗体的工作液分别滴加于载玻片上并均匀铺于圆形范围内，每张载玻片滴加1滴，将载玻片放入加有10%中性缓冲甲醛的湿盒内，置于37 ℃，1 h后，取出载玻片，于蒸馏水中轻轻涮洗1 min，取出，置于超净工作台(上海锦屏仪器仪表有限公司，型号为SW-CJ-3)中晾干以备扫描。依上述方法同时制备不滴加任何抗体的空白载玻片作为对照。……