副猪嗜血杆菌RfaF 基因的原核表达及抗原性分析

2013-08-14冯晓辉余远迪任玉鹏

动物医学进展 2013年4期

冯晓辉，余远迪，任玉鹏，岳华，张斌

（西南民族大学生命科学与技术学院，四川成都610041）

副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis）是一种不能运动的、革兰阴性短小杆菌，能引起以纤维素性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎为主要特征的Glässer′s病［1］。H.parasuis引起的感染给养猪业带来了巨大的损失。革兰阴性菌的脂多糖（LPS）在其致病性中发挥重要的作用［2-5］。Bouchet B等［6］发现H.parasuis LPS部分参与了细菌对猪脑微血管内皮细胞和猪呼吸道上皮细胞的黏附作用和诱导IL-6和IL-8释放［6-7］。LPS是革兰阴性菌细胞壁的成分，由类脂A（Lipid A）、核心多糖和O多糖侧链组成。Lipid A为构成内毒素活性的糖质，以共价键链接在核心多糖上。而核心多糖是研究LPS功能和结构的重要部分。庚糖基转移酶是核心多糖重要的组成成分。庚糖基转移酶Ⅰ（HepⅠ）、庚糖基转移酶Ⅱ（HepⅡ）和庚糖基转移酶Ⅲ（HepⅢ）依次连接到Lipid A和3-脱氧-D-甘露-辛酮糖酸（Kdo）上。在革兰阴性菌中，庚糖基的缺失使得LPS的糖链严重的缩短，对血清中补体、抗菌肽和有机溶剂的敏感性上升，对宿主的致病性、黏附入侵能力等生物学特性发生变化。RfaF基因编码HepⅡ，该蛋白在细菌LPS的合成中是必不可少的。研究证实H.parasuisΔRfaF缺失株降低了对宿主细胞黏附入侵作用和抗血清中补体杀菌作用［8］。为了进一步研究H.parasuis RfaF的特性，本研究用大肠埃希菌表达系统对RfaF基因进行克隆和表达，为深入研究RfaF基因的功能和LPS在H.parasuis菌中的作用奠定了基础。