张靖飞，张 园，李志辉，王慧煜，曹达江，梅 琳＊

（1.西安市动物疫病预防控制中心，陕西西安710061；2.山西农业大学动物科技学院，山西太谷030800；3.中国检验检疫科学研究院，北京100029；4.天杰仁和生物科技（北京）有限公司，北京100029）

猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome PRRS）又称“猪蓝耳病”，是由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起的以成年猪繁殖障碍、早产、流产和死胎，以及仔猪呼吸异常为特征的传染病，是一种免疫抑制性疫病，常常继发其他病原感染。1987年在北美首次发现该病［1］，目前世界上许多国家和地区都发生过猪繁殖与呼吸综合征，该病于20世纪90年代中期传入我国。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须报告的动物疫病。

高致病性猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致死性传染病，我国于2006年发现［2］。仔猪发病率可达100%、病死率可达50%以上，母猪流产率可达30%以上，育肥猪也可发病死亡是其特征。

猪繁殖与呼吸综合征病毒为单股正链RNA病毒，国外的研究表明，同一基因型的PRRSV分离毒株之间存在明显的序列差异，特别是在基因组ORF1a的NSP1b和NSP2，ORF3和ORF5的变异性很大［3］。我国已发现NSP2的变异主要表现在氨基酸的缺失，而目前发现的高致病性猪蓝耳病就是由NSP2缺失30个氨基酸的变异株引起的［4-10］。本文根据GenBank上已经公布的国内部分高致病性PRRSV NSP2区的特点设计引物探针，结合PRRSV通用引物探针，建立一种双重荧光RT-PCR的方法，进行PRRSV普通株（以下简称PRRSV）和高致病性株（以下简称HP-PRRSV）的检测。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞毒 包括高致病性毒株（编号为BJ-4，L11304）和普通株（编号为DX，GZ），毒株均由天津大学黄金海教授惠赠。……