章振华，李 林，沈 佳，景小冬，陈小玲，史爱华，张建伟，黄凤军，姜北宇

（北京市农林科学院畜牧兽医研究所，北京100097）

A型产气荚膜梭菌滤液系用A型产气荚膜梭菌菌株接种适宜培养基，收获培养液离心后取上清过滤而成。通常认为A型产气荚膜梭菌滤液中含有磷酸酯酶C［1-2］，可用其取代价格昂贵的商品化磷酸酯酶C来处理鸡传染性支气管炎病毒（IBV），使该病毒表现出血液凝集（HA）活性，从而制备出IBV血凝抑制试验（HI）抗原［3-5］。IBV HI抗原用来检测鸡传染性支气管炎（IB）疫苗免疫后鸡群的HI抗体水平。目前国内IB灭活疫苗的效价检验都用进口IBV HI抗原来测定，我国还没有商品化的IBV HI抗原。课题组近年来一直研究如何制备出特异、敏感、稳定的IBV HI抗原，而作为制备IBV HI抗原一种重要的原材料，A型产气荚膜梭菌滤液质量的好坏直接关系到IBV HI抗原的质量。因此，建立A型产气荚膜梭菌滤液质控标准对于生产出合格的IBV HI抗原产品至关重要。一般认为磷酸酯酶C是使IBV呈现HA活性的酶类物质，只要测定A型产气荚膜梭菌滤液中磷酸酯酶C的含量，就能够确定A型产气荚膜梭菌滤液的准确加入量，从而建立起可靠的制备IBV HI抗原用A型产气荚膜梭菌滤液的质控标准。对A型产气荚膜梭菌滤液中的卵磷脂酶C进行含量测定有两种方法，一是小鼠致死性试验，由于卵磷脂酶C（α毒素）是A型产气荚膜梭菌培养过程中产生的最主要的外毒素［6-8］，其含量的多少与小鼠致死性直接相关，因此，测定滤液对小鼠的最小致死剂量（MLD）可间接反应卵磷脂酶C的含量；……