范 晴，谢芝勋，刘加波，庞耀珊，邓显文，谢志勤，谢丽基，罗思思

（广西兽医研究所 广西动物疫苗和新技术重点实验室，广西南宁530001）

牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus，BVDV）可引起的牛的致死性腹泻，呼吸障碍及繁殖失败。怀孕母牛感染BVDV后，可引起死产、流产以及胚胎畸形，或是分娩出表面看似正常的持续感染的犊牛。这种持续感染的犊牛虽不表现任何临床症状，但可终身带毒，持续排毒，成为重要传染源，而且一旦当再次接触BVDV相似性抗原立刻继发为黏膜病，表现为急性脱水性腹泻，病死率高达100%，给养牛业造成重大的经济损失［1-2］。

BVDV属于黄病毒科瘟病毒属，其基因组为单股正链RNA，全长约12.5kb，仅含有一个能编码约4 000个氨基酸多聚蛋白大的ORF，ORF两侧的各有一个非编码区（UTR）。多聚蛋白经翻译和加工后，可形成11种成熟的蛋白，其基因在基因组上相对 的 顺 序 为：5′-p20-pl4-gp48-gp25 （E1）-gp53（E2）-p125（NS2-3）-cp54／p80（NS3）-p10（NS4A）-p30（NS4B）-p58（NS5A）-p75（NS5B）-3′，其中C、Ems、E1、E2是病毒的结构蛋白［3］。囊膜糖蛋白 E2由gp53编码，位于BVDV囊膜表面，能诱导中和抗体的产生，介导免疫中和反应，参与宿主细胞识别、吸附过程，因此作为诊断抗原具有良好的前景。E2蛋白由374个氨基酸残基组成，位于ORF的2 077位～3 198位，蛋白分子质量约为42ku。E2蛋白保守性低，在各个毒株中变异较大，分为2个可变区（V1和V2）。氨基酸序列分析证实，糖蛋白E2区存在着2个高可变结构域，疏水性分析证实这2两个结构域是亲水的，表明它们位于病毒粒子的外表面，是病毒引起免疫应答产生的保护性抗的重要原决定簇，参与病毒的感染过程［4］。由于BVDV仅有一种血清型，因此本研究将在昆虫细胞上表达BVDV E2基因，并将获得天然蛋白折叠特性的BVDV E2囊膜蛋白制备出具有良好反应原性的抗原，为BVDV抗体检测试剂盒的研发奠定基础。……