彭艳平， 余水静， 赖和劲

（江西理工大学资源与环境工程学院，江西赣州341000）

本实验以SRB 法处理含Cu2+的AMD 为背景，通过富集培养分离获得SRB 菌株，对SRB 菌株的生长条件进行优化试验， 并利用含Cu2+的AMD 对其进行驯化，以获得高抗性SRB 菌株，为SRB 处理含Cu2+的AMD 工艺研究提供基础.

1 材料与方法

1.1 菌种来源

样品来源于福建上杭某污水处理厂回流污泥.

1.2 富集培养基

采用Postgate’s C 培养基， 各成分浓度为：KH2PO40.5 g/L，CaSO41 g/L， NH4Cl 1 g/L，FeSO4·7H2O 0.01 g/L，Na2SO44.5 g/L，CaCl2·H2O 0.06 g/L，MgSO4·7H2O 0.06 g/L， 柠檬酸钠0.3 g/L， 乳酸钠3.5 g/L，酵母浸膏1.0 g/L，用20 %NaOH 调pH.

1.3 SRB 富集与分离

从某污水处理厂取两桶回流污泥，所取污泥为多种微生物混杂共生体系， 为了强化SRB 的优势地位，试验加入Postgate’s C 培养基进行SRB 富集培养， 污泥和培养基的混合比例为1∶1. 在30 ℃室温进行摇瓶振荡密闭培养， 至培养基颜色变黑，4 天后有臭鸡蛋味， 用醋酸铅试纸条置于瓶口测试，试纸变黑，说明有H2S 气体产生，每周更换新鲜培养基一次，培养基颜色变黑时间逐渐缩短，表明培养液中SRB 已逐渐占优势地位，4 周后获得了富集菌液.

1.4 SRB 驯化实验

以Postgate’s C 培养基为基础培养，采用逐步提高Cu2+浓度和逐步降低pH 驯化SRB. 采用1000 mL锥形瓶，分装900 mL 的培养基后，按10 %接种量接种菌液. 密闭，恒温生化箱内30 ℃培养，当浓液变黑并且瓶口处散发出硫化氢的臭鸡蛋味时，表明SRB 已大量繁殖，即可进行驯化.

驯化试验设计按照表1 条件进行，加入不同量的CuSO4至装有SRB 的锥形瓶中， 使Cu2+浓度逐渐升高，再用20 %H2SO4调菌液pH，使pH 逐渐降低， 观察记录菌的生长情况. 在第1 批试验条件下，驯化时间为7 d，将获得的SRB 作为第2 批驯化的试验菌种进行……