6个中药单体对结肠腺癌细胞SW620体外增殖活性的影响
2013-08-06张敏叶春曹录秀盛艳梅
张敏,叶春,曹录秀,盛艳梅
(成都医学院药学院,成都 610083)
结肠癌(colon cancer,CC)指发生在盲肠、升结肠、横结肠、降结肠、乙状结肠的恶性癌瘤。近年来,随着生活水平的提高、生活习惯的改变,结肠癌在我国的发病率呈不断上升趋势,在消化道肿瘤中已仅次于胃癌,位居第2。苦参、三七、大黄是中医临床用于治疗CC的经验方中的三味常用中药,据文献[1-3]报道,三味药材中的化学成分具有一定的抗肿瘤活性。
为进一步研究其对结肠癌的作用及物质基础,以筛选抗癌疗效确切的组分配伍新方,本文拟对三味中药中多个单体成分的体外抗癌活性进行对比研究。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞株 结肠腺癌细胞株SW620(购于中国科学院细胞库)。
1.1.2 药品与试剂 苦参碱(XC071201)、氧化苦参碱(XC071212)购自西安小草生物技术有限公司,大黄 素 (MUST-11042601)、芦 荟 大 黄 素 (MUST-10112301)、人参皂苷Rh2(MUST-09071501)、人参皂苷Rg1(MUST-11041201)购自成都曼思特生物科技有限公司。DMEM高糖培养基(Hyclon公司)、胰蛋白酶(GIBCO公司),MTT、DMSO(均购自Sigma公司),胎牛血清(PAA),其余为国产分析纯。
1.1.3 主要仪器 倒置相差显微镜(Olympus IX70,Japan)、CO2孵箱(Thermo 3111)、超净工作台(SW-CJ-2FD,苏 州 净 化 公 司,中 国 )、超 纯 水 仪(Millipore)、酶标仪(Multiskan MK3)等。
1.2 方法
1.2.1 药物配制 称取适量苦参碱、氧化苦参碱、大黄素、芦荟大黄素、人参皂苷Rh2、人参皂苷Rg1,均用无血清培养基溶解成相应浓度,过滤除菌备用。
1.2.2 细胞接种培养[1]取对数生长期细胞,消化后吸管吹打使之分散均匀制成单细胞悬液,按1×105个/mL细胞,100μL/孔接种于96孔培养板中,分别加入相同体积的各不同浓度受试药液,同时加入适量完全培养液(900mL/L DMEM培养基,100 mL/L胎牛血清,青霉素1×105U/L,链霉素1×105U/L)补足,终体积为200μL/孔(每组6个复孔),同时设空白对照组,继续培养24、48h。……
