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幽门螺杆菌双基因多表位重组原核表达工程菌的构建及其表达特性的研究

2013-08-06杨靖潘兴欧琴周法庭李建春祝捷周永君李明远王保宁

成都医学院学报 2013年4期

杨靖,潘兴,欧琴,周法庭,李建春,祝捷,周永君,李明远,王保宁△

(1.四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室,成都 610041;2.四川万可泰生物技术有限责任公司,成都 610041;3.湖北医药学院微生物学教研室,十堰 442000)

幽门螺杆菌(H.pylori)已被WHO定为第I类生物致癌因子,有大量研究[1,2]证实幽门螺杆菌感染与急慢性胃炎、胃十二指肠溃疡、胃癌及胃粘膜相关淋巴瘤(MALT)等疾病密切相关。幽门螺杆菌感染多发生于发展中国家和第三世界,据胡伏莲等[3]报道,我国20个省市幽门螺杆菌的感染率为42%~90%[3]。幽门螺杆菌感染会加重其他细菌和病毒肠道疾病[4]。目前临床上常采用三联或者四联方法治疗幽门螺杆菌感染,但治疗方法复杂,存在病人依从性差和费用昂贵等问题,使幽门螺杆菌易产生耐药性[5,6],难以达到根治目的。减毒或灭活幽门螺杆菌疫苗虽成功诱导机体黏膜免疫,但易产生发热、呕吐、腹泻等不良反应[7],重组幽门螺杆菌疫苗由于具有免疫效果好、危险性低、免疫持久等优势,显示出良好的研究前景。

随着对幽门螺杆菌发病机制的深入了解,已证实尿素酶、空泡毒素、粘附素和细胞毒性相关蛋白等对幽门螺杆菌的生长起重要作用[8],其中尿素酶对于幽门螺杆菌的生存和侵袭尤为关键[9]。1990年Pallen等就提出以尿素酶作为抗原研制疫苗,随后Tomb等对幽门螺杆菌基因进行测序,发现至少7个幽门螺杆菌基因参与编码催化活性的尿素酶,其中ureA、ureB编码一个分子量大小约为550kDa多聚脱辅基酶蛋白,ureE、ureF、ureG、ureH、ureI编码镍离子结合到多聚脱辅基酶蛋白有关的辅助蛋白[10]。……

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