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探讨三种梅毒血清学检验方法的临床应用

2013-06-23

中国医药指南 2013年2期
关键词:螺旋体梅毒灵敏度

袁 柳

(株洲市一医院检验科,湖南 株洲 412000)

探讨三种梅毒血清学检验方法的临床应用

袁 柳

(株洲市一医院检验科,湖南 株洲 412000)

目的 通过分析比较 3 种梅毒血清学检测方法的敏感性和特异性,探讨三种梅毒血清学检测法临床应用。方法 甲苯胺红不加热血消试验(TRUST)、应用酶联免疫吸附试验(TP-ELIA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)三种梅毒血清检测方法对 84 例确诊的梅毒患者与 916 例非梅毒患者进行梅毒检测实验,比较三种方法值得正确率、灵敏度、特异性。结果 三种梅毒血清检测方法灵敏度相比较,以TPPA 灵敏度最高、ELISA 的灵敏度次之。三种方法的特异性比较,TPPA 与 ELISA 的特异性最高,TRUST 的特异性最低。结论 ELISA检测法特异性强、灵敏度较高、操作简便,试剂价格比较便宜,是临床梅毒血清检测的首选方法。

梅毒;TRUST、TP-ELISA、TPPA

梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的慢性感染性疾病,主要通过性接触传播,梅毒孕妇则可以通过胎盘感染胎儿而引起先天性梅毒[1]。目前临床上梅毒血清检测的方法有:梅毒胶体金法(SYP)、甲苯胺红不加热血消试验(TRUST)、梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)、酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)等。梅毒血清检测的方法很多,本文采用酶联免疫吸附试验 (TPELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、甲苯胺红不加热血消试验(TRUST)三种梅毒血清检测方法同时检测了1000例标本,并对检测结果进行比较分析,为临床选择检测方法提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 根据梅毒诊断标准[2]

确定的早期潜伏梅毒15例,一期梅毒28例,二期梅毒32例,三期梅毒9例。临床床确诊类风湿关节炎者9例、结核病患者12例、临床治愈后复查者18例和健康体检者877例。

1.2 试剂

TRUST试剂上海荣盛生物技术有限公司提供、TPPA由日本富士株式会社提供、ELISA试剂盒购自自珠海丽珠试剂有限公司。

1.3 方法

按照TRUST、TP-ELISA和TPPA试剂说明书进行操作,一份血清标本采用这三种方法做平行检测。

2 结 果

三种检查方法检查的结果:阳性率见表1,灵敏度和特异性见表2,临床治愈后复查者因情况特殊,不参与灵敏度和特异性计算。

表1 TRUST、TP-ELISA和TPPA三种方法检测出的结果

表2 3种检测方法灵敏度和特异性结果比较

3 讨 论

梅毒是一种性病,人是梅毒的唯一传染源,可通过性传播传染或脐带血传给下一代。人感染梅毒后,血清会产生一系列反应,产生两种抗体,一种是特异性抗体,可将螺旋体杀死或溶解,对机体再感染有保护作用。另一种是非特异性抗体,能与正常生物组织的类脂抗原发生非特异性结合,对人体没有保护作用。临床梅毒血清检测方法有有很多,主要可分为两大类,一类是非梅毒螺旋体抗原血清试验又称类脂血清反应,即用正常的牛心肌的磷脂作为抗原,检测患者血清中抗心磷脂抗体。如性病实验室试验(VDRL)、快速血浆反应素(RPR)、甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST)均属于类脂质血清反应。一类是检测梅毒特异性抗体,用活的或死的梅毒螺旋体或其他成分作为抗原检查抗梅毒螺旋体抗体,如酶联免疫吸附试验(ELISA);用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒,此致敏颗粒与人血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合,产生可见的凝集反应,如梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验 (TPPA)。

通过本次试验结果,结合临床治疗过程中试验室梅毒血清检测情况得知:TRUST 是用心磷脂作抗原,检查患者血清中的反应素。由表1、表2的结果可得知,TRUST检测法的是非梅毒特异性抗体,容易出现假阳性。TRUST与TP-ELISA、TPPA相比灵敏度低、特异性差。由于非特异性抗体是在梅毒一期后增加,因此,TRUST不适合做梅毒的早期诊断。但是TRUST检测方法,试剂价格便宜,操作简单,反应快,并且在二期梅毒滴度最高,临床主要用于梅毒的筛选和疗效观察。TP-ELISA是将梅毒特异性抗原包于固相板孔中,检测患者血清中的特异性抗体。TP-ELISA利用酶的 放大系统,提高了检测的灵敏度,甚至可以比TPPA能更早检测梅毒螺旋体特异性抗体[3],适合做梅毒的早期诊断。TP-ELISA灵敏度、特异性均较高,操作简单,试剂价格相对比较便宜,适用于血站梅毒筛选,医院大批量体检,梅毒的早期检查。但是,此法是检验患者血清中抗梅毒螺旋体IgG抗体。由于,患者感染梅毒后,血清中产生抗体,经过治疗后仍然长期存在,甚至终身不会消失,复查患者血清中仍出现阳性反应。因此,此法检测的结果呈阳性,只能说明该患者曾经或现在正感染梅毒。所以,此法不能用于患者的治疗观察。TPPA法灵敏度高、特异性高。但是,试剂成本高,用于半定量分析检测时,操作过程繁琐,所耗时间长,不能用于快速检测。TPPA检测是患者血清中梅毒的特异性抗体,复查患者阳性率高。鉴于TPPA灵敏度高、特异性强等优点,建议用于临床梅毒的确证实验。

综上所述,ELISA法有着操作简单、快捷等优点,检测的结果假阴性率较低,用作筛选实验,减少漏诊率。检测结果准确率高,减少了患者心里压力和家庭矛盾纠纷,也减少了医疗纠纷。但是,ELISA法检测的是患者血清中的梅毒特异性抗体,复诊患者出现假阳性率高。因此,有既往病史的患者应采用ELISA法和TRUST法两种方法进行筛选,检查结果呈阳性,再用TPPA法确诊,以免漏诊。

[1]叶顺章.性传播疾病的实验室诊断[M].北京:科学出版社,2001.

[2]龙振华,张石革.性传播疾病诊断与药物治疗学[M].北京:北京科学技术出版社,1999:334-336.

[3]孙立平,陈胜明.两种梅毒检验方法的适用性分析[J].中国输血杂志,2002,15(4 ):247-248.

R759.1

:B

:1671-8194(2013)02-0241-02

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