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HAK基因对玉米的遗传转化及其耐盐性研究

2013-06-01汪婷婷关春峰

季 静,汪婷婷,王 罡,吴 疆,关春峰

(1. 天津大学化工学院,天津 300072;2. 天津大学遗传工程研究所,天津 300072)

HAK基因对玉米的遗传转化及其耐盐性研究

季 静1,2,汪婷婷1,2,王 罡2,吴 疆1,关春峰2

(1. 天津大学化工学院,天津 300072;2. 天津大学遗传工程研究所,天津 300072)

用农杆菌介导法将高亲和性钾离子转运体基因(HAK)和Bar基因转入5个优良玉米自交系7922、P138、265、238和271中,并对影响其遗传转化效率因素进行了优化.经PCR和RT-PCR检测证实获得阳性植株.除草剂涂抹实验证明Bar基因已经整合进玉米基因组.用不同浓度的盐溶液处理转基因植株和对照植株,发现转基因植株叶片中的K+含量、脯氨酸和叶绿素含量均高于未转化植株,而Na+含量低于未转化植株,表明HAK基因已经整合进玉米基因组,并通过过量表达提高了植株的耐盐性.

玉米自交系;农杆菌介导;HAK;耐盐性

玉米是世界上重要的粮食作物和工业原料之一,因此玉米的遗传转化技术一直是各国科学工作者研究的热点.目前,将外源基因转入玉米的方法主要有2种:农杆菌转化法和基因枪法[1].相对于其他转化法来说,农杆菌转化法具有能完整转化较大的DNA片段、外源基因拷贝数少、整合位点比较稳定且不需要进行原生质体培养等优势[2],已成为植物基因工程中应用最为广泛的技术.虽然这项技术已被成功应用于30多种双子叶植物的转化,但是单子叶植物特别是像玉米、水稻、小麦等这些重要的农作物却一直被排除在农杆菌的天然宿主范围之外.因此……

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