周 阳 ， 祝长青 ， 郭云昌 ， 郭桂萍 ， 蒋 原 ， 刘秀梅 ， 付瑞燕 *

（1.安徽农业大学 茶与食品科技学院，安徽 合肥 230000；2.安徽省食品安全分析与检测省级实验室，安徽 合肥230000；3.江苏出入境检验检疫局，江苏 南京 210001；4.国家食品安全风险评估中心，北京 100022）

从20世纪90年代起，单核细胞增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes，LM）就被世界卫生组织列出的最重要食源性病原菌之一[1-2]。该菌多存在于土壤、人和动物的粪便中，极易污染食品并引起人和动物的李斯特菌病，临床上多表现为人和动物脑膜炎、败血症、流产等症状，妊娠期妇女、新生儿及免疫功能低下者均为易感人群[3]。该病发病率低，但临床死亡率高。近年来，多次发生由单核细胞增生李斯特氏菌引起的食源性疾病的暴发并造成部分患者的死亡，引起世界各国高度关注[4-5]。

随着现代食品工业的发展和人民群众生活质量的提高，无论是生产企业中生产流程的监测和终产品的质量控制，还是政府部门对食品安全的监管，都迫切需要快速的食源性致病菌检测方法以满足食品检验的时效性。目前，单核细胞增生李斯特氏菌的检验仍以传统培养法为主，操作繁琐，耗时长，不能实现快速筛检[6]。当食品中单核细胞增生李斯特氏菌数目很少时，传统培养法还可能出现假阴性结果。而分子生物学检测技术的快速发展为食源性致病菌的快速鉴定提供了可能，常规聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）方法、实时荧光PCR（real-time PCR）方法、多重PCR等相继建立并得到更多的应用和推广[7]。DNA模板的质量是影响分子生物学检测技术的准确性和重复性的重要因素，而样品DNA模板的质量又与食品基质类型以及核酸提取方法密切相关。……