谢朝云 熊 芸 胡 阳 孙 静

贵阳医学院第三附属医院感染管理科，贵州凯里 556000

流感嗜血杆菌属于条件致病菌，近年来由于抗菌药物的广泛应用，其耐药性不断呈上升趋势，给临床抗感染治疗带来许多困难[1]，特别是老年体弱免疫低下长期反复应用抗菌药物的患者对菌药物的耐药率增高尤为显著。为了解流感嗜血杆菌的耐药状况，指导临床采取有效的措施预防感染及合理地使用抗菌药物具有指导意义，对本院送检儿童与老年人痰标本中分离的流感嗜血杆菌的分布及其耐药监测，现将监测结果报道如下。

表1 儿童与老年人流感嗜血杆菌对抗菌药物的耐药率（%）

1 资料与方法

1.1 菌株来源

收集本院2011年6月—2013年6月临床儿童与老年人痰标本中分离的副流感嗜血杆菌71株，分组标准：小于14周岁为儿童组，大于65周岁为老年人组。

1.2 药敏纸片

所有的抗菌纸片均由赛默飞世尔生物化学制品（北京）公司提供。

1.3 培养基与药敏试验

M-H琼脂由英国Oxoid公司提供，采用K-B纸片扩散法进行药敏实验。按美国临床和实验室标准化协会(CLSI)的标准判断结果。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0统计软件进行统计分析，计数资料以率和百分数表示，采用χ2检验。

2 结果

2.1 菌株年龄分布

我院2011年6月—2013年5月临床儿童与老年人痰标本中分离的流感嗜血杆菌68株，其中儿童年龄小于14岁分离出43株，占63.24%；老年人年龄大于65岁患者分离出25株，占36.76%。

2.2 菌株科室分布

临床儿童与老年人患者痰标本中分离的流感嗜血杆菌68株中，儿科39株（57.35%）、呼吸内科14株（20.59%）、心血管内科8株（11.77%）、消化内科2株（2.94%）、ICU2株（2.94%）、肾内科1株（1.47%）、感染科1株（1.47%）、内分泌科1株（1.47%），其中儿科、呼吸内科与心血管内科检出率最高。

2.3 菌株季节分布

临床儿童与老年人患者痰标本中分离的流感嗜血杆菌68株中，一年四季均有检出，以1月(13.24%)、2月(16.18%)、3月(13.24%)、4月(14.71%)、5月(11.76%)为高发期。

2.4 抗菌药物敏感试验

不同年龄组痰标本中分离出的副流感嗜血杆菌对抗菌药物的耐药率不同,从儿童送检标本中分离出的流感嗜血杆菌对抗菌药物的耐药率明显高于老年人分离出的菌株。儿童与老年人患者流感嗜血杆菌对抗菌药物的耐药率见表1。

其中庆大霉素(11.63%,40%)、氨苄青霉素(34.88%,72%)、氨苄西林/舒巴坦(27.91%,60%)、头孢哌酮(4.65%,32%)、头孢克洛(2.33%,28%)等5种抗菌药物耐药性差异具有统计意义（P＜0.05）。

3 讨论

流感嗜血杆菌广泛地寄居于正常人上呼吸道，可引起细菌性肺炎以及化脓性脑膜炎、会厌炎、蜂窝组织炎、关节炎、骨髓炎等原发性和继发性感染。其所致疾病大多以呼吸道感染为主，主要常见于儿童与老年免疫功能低下患者，由于环境污染、抗菌药物滥用及机体免疫功能下降等多方面原因，流感嗜血杆菌的耐药率呈逐年上升[2]。

本监测结果显示，本院2011年6月—2013年6月临床儿童与老年人痰标本中分离的流感嗜血杆菌68株中儿科、呼吸内科与心血管内科检出率最高，呼吸内科和心血管内科有慢性肺部疾病或并发肺部疾病的患者，其流感嗜血杆菌分离率较高，尤其在病情较重、肺功能较差的患者中分离率均较高，据报道流感嗜血杆菌在老年慢性阻塞性肺病急性加重和进展中起重要作用[3]，提示流感嗜血杆菌在肺部感染疾病中，特别老年病情较重、肺功能较差、自身免疫水平低的患者中感染率在上升。

随着抗生素的大量使用，越来越多的流感嗜血杆菌菌株产生了耐药性，特别老年病情较重、肺功能较差、自身免疫水平低的患者中多有反复接受抗菌药物、激素以及免疫抑制剂等多种药物治疗，因此在老年人患者的痰标本中检出的流感嗜血杆菌率的耐药菌株也越来越多。

本院2011年6月—2013年6月临床儿童与老年人患者痰标本中分离的流感嗜血杆菌68株，分组标准：小于14周岁为儿童组，大于65周岁为老年人组。其中儿童年龄小于14岁分离出43株，占63.24%；老年人年龄大于65岁患者分离出25株，占36.76%。季节分布显示一年四季均有检出，以1月(13.24%)、2月(16.18%)、3月(13.24%)、4月(14.71%)、5月(11.76%)为高发期。药敏结果显示，不同年龄组痰标本中分离出的流感嗜血杆菌对抗菌药物的耐药率不同,从儿童送检标本中分离出的流感嗜血杆菌对抗菌药物的耐药率明显高于老年人分离出的菌株。其中庆大霉素(11.63%,40%)、氨苄青霉素(34.88%,72%)、氨苄西林/舒巴坦(27.91%,60%)、头孢哌酮(4.65%,32%)、头孢克洛(2.33%,28%)等5种抗菌药物耐药性差异具有统计意义（P＜0.05）,造成差异有统计学意义的原因很可能与抗生素的使用频率有关。

流感嗜血杆菌对β一内酰胺类抗生素发生耐药的主要机制是被细菌产生的β一内酰胺酶分解而失活。常见的β一内酰胺酶有T EM－1和ROB一1型,其中最常见的是TEM一1型；青霉素结合蛋白结合靶位PBPs改变而引起亲和力降低；细胞膜通透性改变而引起细菌对药物摄取量减少和外排泵机制作用[4]。自1974年首次报道流感嗜血杆菌对氨苄青霉素耐药以来，耐药性逐渐上升[5],本监测结果显示，儿童与老年人患者流感嗜血杆菌对氨苄青霉素、头孢唑啉的耐药率均较高，此外老年人患者流感嗜血杆菌氨苄西林/舒巴坦60%、头孢哌酮32%、头孢克洛28%的耐药率也较高，其中氨苄青霉素(34.88%,72%)、氨苄西林/舒巴坦(27.91%,60%)、头孢哌酮(4.65%,32%)、头孢克洛(2.33%,28%)等4种抗菌药物老年患者的耐药率明显高于儿童，耐药率差异有统计学意义（P＜0.05）。表明老年人患者流感嗜血杆菌对β一内酰胺类抗生素的耐药率较儿童高。

复方新诺明的抗菌作用是通过干扰细胞代谢，从而抑制四氢叶酸的生成。四氢叶酸是细胞反应的一个重要的辅因子。其耐药机制是甲氧苄啶通过改变与二氢叶酸还原酶的亲和力而产生。编码二氢叶酸还原酶的基因常由质粒或转坐子携带，它的改变引起二氢叶酸还原酶产物增加，导致亲和力下降而产生耐药[6]。本监测结果显示，儿童与老年人患者流感嗜血杆菌对复方新诺明均有较高的耐药率，分别为41.86%和52%，可能与复方新诺明的长期使用有关。

流感嗜血杆菌对庆大霉素产生耐药的机制是修饰酶介导的耐药，酶促修饰的庆大霉素不能与核糖体靶位作用，因此失去抗菌活性。本监测结果显示,儿童对庆大霉素耐药率较低11.63%,而老年人患者感染的流感嗜血杆菌对庆大霉素耐药率较高40%,两者耐药率差异有统计学意义（P＜0.05），可能与临床上儿童多限制使用庆大霉素,而成人多有选用庆大霉素史有关。

虽然流感嗜血杆菌对各类抗生索的耐药性与其他细菌相比仍处于较低水平[7]，但鉴于儿童及老年患者的生理特点如氯霉素、氨基糖甙类抗生素、喹诺酮类抗生素等由于副作用较大，使用受到限制，因此β一内酰胺类抗生素仍是治疗流感嗜血杆菌的首选抗菌药物，但β一内酰胺类抗生素的长期使用，流感嗜血杆菌对β一内酰胺类抗生素耐药率较过去已大大提高，特别是老年人患者嗜血杆菌的耐药菌株有逐年上升趋势。

总之，老年患者痰标本中分离的流感嗜血杆菌对5种抗菌药物耐药率明显高于儿童患者，是一个很危险的信号，必须引起重视，抗菌药物的广泛使用在一定程度上是增加细菌的耐药性的重要原因之一，因此，了解流感嗜血杆菌的耐药趋势，可为临床治疗提供可靠依据，合理使用抗菌药物是减慢耐药菌快速增长，有效控制和减缓细菌耐药性的增长趋势的有效方法。

[1] 江秀爱，赵自云，朱婕.74株流感嗜血杆菌的耐药性分析[J].河北医学，2011，17(9)：1239.

[2] 柯永坚，朱红军，肖亮生，等.流感嗜血杆菌耐药性分析[J].实验与检验医学，2010，28(6)：576.

[3] 王东，刘又宁.流感嗜血杆菌在慢性阻塞性肺病急性加重和进展中的意义[J].中华老年多器官疾病杂志，2009，8(2)：18-190.

[4] 朱旭慧，孙自镛，李丽，等.流感嗜血杆菌的分布及耐药性分析[J].实验与检验医学，2010，28(2)：115-116.

[5] 汪复,朱德妹,胡付品，等.2009年中国CHINET细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志，2010,9(5):325.

[6] 桂和翠，王中新，沈纪录.流感嗜血杆菌的耐药性及耐药机制[J].安徽医药，2011,15(12):1471-1474.

[7] 田磊，陈中举，李丽，等.2008—2010年湖北省流感嗜血杆菌标本分布及耐药性分析[J].中国感染控制杂志，2012，11(2)：127.