苗红 叶龙彬 沈金芳 孙黎

（1.上海医药集团股份有限公司中央研究院 上海 201203；2.上海交通大学医学院附属仁济医院 上海 200001）

槐果碱注射液为中药注射剂，其活性成分槐果碱（sophocarpine）是从豆科槐属植物苦参的干燥根及豆科槐属植物苦豆子的种子中分离提取出的有效生物碱之一。本品在体内外试验中，均显示对柯萨奇B组病毒具有明显的抑制作用，能对抗心律失常和调节免疫，改善心功能[1-2]。槐果碱注射液的拟临床适应证为急性成人型病毒性心肌炎的治疗。本研究为槐果碱注射液的I期临床研究，旨在考察槐果碱注射液在健康志愿者中的安全性和耐受性，为制定II期临床试验给药方案提供依据。

1 对象与方法

1.1 受试者选择

1)入选标准：①年龄19～45岁，男女各半，身高体重指数为18～25；②无心、肝、肾、消化道、神经系统、精神异常及代谢异常等病史；③经全面体格检查显示心电图、生命体征以及实验室检查均无异常；④自愿签署知情同意书。

2)排除标准：①妊娠期、哺乳期妇女；②明确的过敏性病史，对槐果碱注射液中各成分过敏者；③有神经精神、心血管、肝脏、肾脏、血液学、代谢等系统的明确病史或其它显著疾病；④实验室检查结果异常且有临床意义者；⑤习惯性用药，包括中草药或入院前两周内服用过可能影响试验结果的药物者；⑥试验前2个月内失血或献血超过200 ml者；⑦试验前2个月内参加过其他临床试验者；⑧嗜烟、嗜酒和药物滥用者；⑨乙肝HBV或者丙肝HCV阳性者。

3)终止试验标准[3]：①在剂量递增过程中出现了严重不良反应；②半数受试者(如3/6)出现轻度不良反应；③在达到最大剂量8 mg/kg时，虽未出现不良反应，亦应终止试验。

1.2 研究方法

1.2.1 试验药物

槐果碱注射液，规格：200 mg/2 ml，批号：080402，由上海医药集团股份有限公司提供。

1.2.2 给药方法

将相应剂量的药物加于5%葡萄糖注射液500 ml内静脉滴注，滴速40～45滴/min，4 h滴注完毕，qd。单次给药剂量组共1 d，多次给药剂量组连续7 d。

1.2.3 试验设计

本研究采用开放性、剂量递增试验设计，试验方案获得上海交通大学医学院附属仁济医院医学伦理委员会的批准。

1）单次给药耐受性试验——

根据槐果碱注射液前期动物毒性试验结果及美国FDA建议的临床试验起始剂量的计算方法，本研究起始剂量定为0.4 mg/kg。剂量递增参照费氏递增法（改良Fibonacci法），试验设置9个剂量组（表1）。

表1 单次给药试验剂量递增方案

2）多次给药耐受性试验——

多次给药耐受性试验在单次给药耐受性试验结束后进行，预做2个剂量组。第1组剂量为单次给药耐受性试验最大耐受量的基础上下降1个剂量，如试验中出现明显的不良反应，则再下降1个剂量进行第2组试验；如试验中未见明显的不良反应，则上升1个剂量进行第2组试验。

1.3 观察指标

1)单次给药：给药前和给药后1、4、5、12、24 h进行心电图和生命体征（血压、心率、呼吸和体温）检查；给药前和给药后5、12、24 h进行实验室检查（包括血、尿常规和血液生化等）。

2)多次给药：每次给药前、给药后24 h进行心电图和生命体征（血压、心率、呼吸和体温）检查；第1次给药前、第4次给药后及最后一次给药后24 h进行实验室检查（包括血、尿常规和血液生化等）；给药前及最后一次给药后24 h，男性受试者进行精液常规检查。

1.4 不良事件观察

给药后随时观察和记录发生的不良事件。根据临床前研究资料，本试验中重点观测：神经系统表现（如头昏、惊厥）、心血管系统表现以及局部刺激，如试验过程中出现过敏、休克、呼吸循环衰竭等，按相应的抢救方法进行治疗。药物与不良事件间相关性分析，根据肯定有关、很可能有关、可能有关、可能无关、肯定无关进行逐一判断。

1.5 数据分析

采用SAS 8.2软件对数据进行统计分析。各组计量指标用（均数±标准差）表示。各组组内前后比较用配对t检验，对各剂量组给药前组间比较及前后差值组间比较采用方差分析。

2 结果

2.1 单次给药耐受性试验

共42名受试者完成了0.4、0.8、1.5、2.5、4、5、6、7、8 mg/kg共9个剂量组的单次给药耐受性试验。各组受试者的年龄、身高、体重、BMI等资料相近，各指标组间的差异均无统计学意义（P＞0.05）。给药前各生命体征和实验室检查指标基本都在正常范围内。试验过程中发生3例不良事件：2.5 mg/kg剂量组有1例白细胞增多，程度为轻度，未采取措施，无合并用药和合并治疗，继续试验，判断与试验用药的关系为很可能有关；7 mg/kg剂量组有2例尿酸升高，程度为轻度，未采取措施，无合并用药和合并治疗，继续试验，判断与试验用药的关系为可能有关。其余受试者的生命体征（体温、心率、血压、呼吸）、心电图、血尿常规、肝肾功能等各项检查未见有临床意义的改变。各组均未发生严重不良事件。

2.2 多次给药耐受性试验

有17名受试者参加了7和8 mg/kg两个剂量组的多次给药耐受性试验，15人完成试验（其中7 mg/kg组完成7例，8 mg/kg组完成8例），退出2例。受试者的一般资料及基础数据各组间的差异均无统计学意义（P＞0.05）。给药前各生命体征和实验室检查指标基本都在正常范围内。试验过程中发生2例不良事件：7 mg/kg剂量组有1例白细胞减少，程度为轻度，未采取措施，无合并用药和合并治疗，继续试验，与试验用药的关系为可能有关；8 mg/kg剂量组有1例精液检查异常，程度为轻度，未采取措施，由于受试者的个人原因，没能继续随访至正常值。研究者判断该不良事件和试验药物可能无关。其余受试者的生命体征（体温、心率、血压、呼吸）、心电图、血尿常规、肝肾功能等各项检查未见有临床意义的改变。未出现严重不良事件。

3 讨论

槐果碱注射液曾经作为院内制剂用于病毒性心肌炎的治疗，据报道其临床给药剂量为5～6 mg/kg，总有效率为93.73% ，未见肝肾功能及血液系统有损伤，少数患者出现恶心和荨麻疹[2]。在本次槐果碱注射液的人体耐受性研究过程中，观察到与试验药物可能有关的不良事件主要为：白细胞增多（1例），血尿酸升高（2例），白细胞减少（1例），程度均为轻度，未采取措施，无合并用药和合并治疗，属一过性。未发生试验方案中重点观测的不良反应，如神经系统表现（头昏、惊厥）、心血管系统表现以及局部刺激等，也未观察到文献报道的不良反应。一方面这可能是药品本身制备工艺的改进，使得药物的纯度明显提高，减少了有关物质的不良反应[4-5]。另一方面还与试验过程中严格控制静脉滴注速度有关。事实上，临床前通过Beagle犬的急性毒性试验已经表明，降低滴速可以大幅提高槐果碱注射液的最大耐受剂量。本研究表明中国健康志愿者单次静脉滴注0.4～8 mg/kg的槐果碱注射液，连续7 d静脉滴注7～8 mg/kg槐果碱注射液是安全的，且人体可以耐受。因此，推荐II期临床试验的拟用剂量为4～8 mg/kg，须严格控制静脉滴速。

参考文献

[1] 张星宇, 陈曙霞, 刘晶星, 等. 槐果碱体外抗柯萨奇病毒B3m的作用[J]. 上海交通大学学报(医学版) , 2006,26(8): 892-894.

[2] 陈曙霞, 陈美芳, 钱富荣, 等. 槐果碱注射液治疗病毒性心肌炎的临床研究[J]. 临床心血管病杂志, 2005, 21(10):608-611.

[3] 蒋萌, 熊宁宁, 刘芳, 等. 中药静脉滴注用药的人体耐受性试验设计[J]. 中药新药与临床药理, 2008, 19(5): 401-403.

[4] 刘梅, 刘雪英, 程建峰. 苦参碱的药理研究进展[J]. 中国中药杂志, 2003, 28(9) : 801-804.

[5] 刘国卿, 袁惠南, 谢林, 等. 槐果碱等苦豆子生物碱对大鼠单胺代谢及多巴胺和5-羟色胺受体的作用[J]. 药学学报, 1987, 22(9): 645-649.