ITRAQ蛋白技术在消化系肿瘤研究中的应用*
2013-03-31综述王志强审校
王 鸣 综述,王志强审校
(中国人民解放军总医院南楼消化内镜诊疗科,北京100853)
蛋白质组学研究策略能高通量地、动态地对比分析健康和疾病不同状态下蛋白质表达谱的改变,可有效地应用于肿瘤标志物的筛选、鉴定、肿瘤分类、治疗效果的评价及肿瘤发生机制等方面的研究,使得肿瘤的诊断、分类、疗效评价由过去应用单一的肿瘤标志物进行判断发展成为现在的应用蛋白质谱或基因表达谱的改变来进行综合判断。
蛋白组学研究技术中双向凝胶电泳技术是目前使用较为广泛的、发展最为成熟的蛋白质组学研究方法。双向凝胶电泳技术及其他蛋白质组学研究技术无法进行多组样本的同时研究,也无法进行定量蛋白质组学研究,即便是此后出现的同位素标记亲和标签技术也只能对蛋白质进行相对定量研究。2004年美国应用生物系统公司推出了一项新的同位素标记技术:同位素标记相对和绝对定量(isobaric tag for relative and absolute quantitation,ITRAQ),可真正实现对蛋白的绝对定量检测,其关键是iTRAQ试剂。该试剂由三部分组成,一端为指示基团,中间为中性平衡基团,另一端为反应基团,指示基团的相对分子质量有4种,分别为114.1×103、115.1×103、116.1×103和117.1×103,与之相对应的平衡基团相对分子质量依次为31×103、30×103、29×103和28×103,4种指示基团及其相对应的平衡基团的相对分子质量和都为145.1×103,故iTRAQ技术有4个试剂,即114、115、116、117,可以同时研究4组样品;而反应基团能与氨基酸N端及赖氨酸侧链连接的胺标记同重元素,亦也可以标记修饰后的氨基酸,故可对磷酸化蛋白、糖基化蛋白等翻译后修饰蛋白进行定量、定性研究。……
