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提高淋巴结病理切片质量的体会

2013-03-04宋容,肖觉

重庆医学 2013年25期

宋 容,肖 觉

(重庆市肿瘤研究所病理科 400030)

淋巴结切片常规HE染色的制片方法一直是病理技术的难题[1],其原因除淋巴结病变本身的复杂性外,主要还是由于切片质量较差所致。质量差的淋巴结切片比其他组织更容易造成假象而导致误诊。淋巴结病理诊断误诊率高达10%~30%,其中切片因素占多数[2]。淋巴结切片的制片必须遵循“薄切、淡染”的原则。按常规方法难以制作出优质淋巴结切片,为了克服淋巴结制片时经常出现裂痕、皱褶、破碎,染色过深或过浅等问题。作者经过多年的临床实践,总结出了一些优质淋巴结切片的制片经验和体会,现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料 本院2011年1月至2012年12月淋巴结活检标本50例。

1.2 试剂 改进的B-5固定液[3][(1)1%鞣酸1mL;(2)95%乙醇加8g水杨酸80mL;(3)甲醛15mL,3种液体混合配制成100mL后,取B-5液66mL加入甲醇480mL和氯仿240 mL混合,再加入醋酸80mL]。苏木精(hematoxylin)染色液、伊红(eosin)染色液、乙醇、硬脂酸、石蜡、0.5%~1.0%盐酸乙醇、二甲苯。

1.3 方法

1.3.1 固定 改进前常规淋巴结组织标本采用10%甲醛固定液,改进后淋巴结标本采用改进的B-5固定液。

1.3.2 取材 淋巴结取材大小1.0cm×1.0cm×0.3cm,取材要规范,取材刀要锋利,避免组织挤压,发生严重变性。

1.3.3 脱水 选用乙醇脱水效果最佳,从低浓度到高浓度乙醇脱水,脱水要彻底,脱水时间要严格控制。

1.3.4 透明及浸蜡 改进前用二甲苯透明剂石蜡浸蜡,改进后用硬脂酸和石蜡的混合液替代二甲苯透明剂。

1.3.5 包埋切片 硬蜡包埋,切片厚度2.5~3.0μm为宜,裱片,展片,烤片。

1.3.6 染色 苏木精染液染色时间短,流水冲洗,0.5%~1.0%盐酸乙醇分化,热水返蓝,伊红染色数秒,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。……

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