■徐丽 王冠 丁皓 程瑛

(武汉新华扬生物股份有限公司，湖北武汉 430074)

木聚糖是植物半纤维素的主要成分，是自然界中仅次于纤维素的可再生资源，主要成分为D-木糖。虽然木聚糖是一类广泛存在于植物体内的半纤维素，但是，由于木聚糖在动物消化道内不能被消化吸收，并且阻碍其它营养成分的消化利用，具有很强的抗营养特性，因而限制了许多饲料的应用。木聚糖酶是一类重要的木糖苷键水解酶酶系，可将木聚糖逐次降解为低聚木糖及木糖，从而消除木聚糖的抗营养作用，提高动物对饲料的利用率。目前检测木聚糖酶最常用的方法为DNS法，但此法灵敏度低，难以满足饲料中微量添加量的检测。3-甲基-2-苯并噻唑酮腙（MBTH）法主要用来测定醛的含量，由于木糖的半缩醛结构具有一定的还原性，MBTH首先与还原糖反应生成嗪，过量的MBTH被Fe3+氧化成阳离子，再与嗪反应生成青蓝色化合物，在一定范围内，还原糖的量和反应液的颜色强度呈正比例关系。本文根据这一原理检测木聚糖酶的酶活力，旨在验证该方法的可行性。

1 材料与方法

1.1 试剂与设备

木糖（sigma）、木聚糖（sigma）、木聚糖酶、3-甲基-2-苯并噻唑酮腙(MBTH)、二硫苏糖醇（DTT）、硫酸铁铵、氨基磺酸、乙酸、乙酸钠、氢氧化钠试剂等。

紫外-可见分光光度计（Unico UV2800）、水浴摇床（常州国华）、漩涡混合器、电子天平（精确至0.000 1 g）、带搅拌的恒温水浴锅（HH-4，常州国华）、移液器、秒表设备等。

1.2 样品

木聚糖酶及饲料样品均采购于市场。

1.3 溶液及其配制

50 mM pH值5.5的乙酸-乙酸钠缓冲液：称取三水乙酸钠5.785 g，加入冰乙酸0.425 ml，加水溶解，定容至1 000 ml。……