赵晓萍蒲传强

（1 北京军区总医院神经内科，北京100700；2 解放军总医院神经内科，北京 100853）

肌肉病理未见异常的肌无力患者肌肉组织myostatin基因mRNA表达

赵晓萍1蒲传强2

（1 北京军区总医院神经内科，北京100700；2 解放军总医院神经内科，北京 100853）

肌肉病理；肌无力；肌肉组织

病理检查结果阳性是疾病诊断的金标准，正常成人肱二或股四头肌肌纤维直径 60～80μm，肌质均匀，肌核扁平，位于周边，每根肌纤维横断面上肌核数不超过5个。I、IIA、IIB型肌纤维各占约1/3。常规病理检查符合上述标准，结论通常是肌肉病理检查未见异常。Myostatin属于转化生长因子-β（TGF-β）超家族的成员之一，是骨骼肌生长发育抑制因子（肌抑素）。由骨骼肌分泌，作用于卫星细胞，其基因突变或抑制其表达后动物（牛、兔、狗及人）骨骼肌异常发达。本研究的目的是探讨酶组织化学染色病理结果未见异常的肌无力患者肌肉组织中Myostatin基因mRNA的表达情况。

1 对象与方法

1.1 对象

自觉肌肉无力，但体检、肌酶谱及肌电图检查未见异常患者9例。年龄14～45岁，平均年龄25.3岁，病程3～48个月，平均病程11.8个月。其中，男性4例，年龄14～45岁，平均年龄27岁，病程6～48个月，平均18个月；女性5例，年龄18～27岁，平均年龄23岁；病程3～11个月，平均6个月。具体每例临床特点如下，见表1。

1.2 方法

标本获取：左侧肱二头肌开放式活检，常规冰冻切片组织学检查未见明显异常。

Myostatin mRNA表达情况分析：应用RT-PCR方法，检测肌肉组织中Myostatin mRNA表达，并以管家基因GAPDH mRNA表达水平为内参照，经凝胶电泳鉴定，图像分析系统分析积分光密度值（A），计算表达指数（I）I myostatin = A myostatin/ A GAPDH。

2 结 果

灰度测定显示各例肌肉组织中GAPDH 基因mRNA表达水平相近（灰度值739～788，年龄相关系数-0.1341）。9例患者中2例未见Myostatin mRNA表达（男女各1例），7例有表达。有表达者的表达指数I为0.16～1.15；平均表达指数为0.5655。男女分层后表达指数无明显差别（0.425 vs0.678，P=0.4185）。表达指数与活检时的年龄的相关系数为0.2961，与病程的相关系数为0.0399。男性年龄相关系数为0.6855，女性为0.2306；男性病程相关系数为0.2083，女性为0.5799。

3 讨 论

血清肌酸激酶活性（CK）及肌电图未见异常，临床表现为肌肉无力的骨骼肌疾病包括轻型先天性肌病、代谢性肌病、神经肌肉接头疾病及周围神经病早期等，全身性疾病亦可表现为肢体无力及沉重感。肌肉病理未见异常的无力性疾病有神经肌肉接头疾病、超微结构异常性肌病、未认识的疾病、全身性疾病，或情感障碍性疾病。

Maher AC等以两组年龄在18～25岁（12例vs 12例、11例vs 13例）的健康志愿者为对象的研究表明，男女肌肉组织中Myostatin基因mRNA及蛋白含量均无明显差别，均明显低于内标基因及蛋白（β-actin）含量[1]。与其结果相似，本组男女患者的myostatin mRNA表达亦无明显差异，不同的是其中2例未见表达。产生这一结果的原因可能系本组研究对象为肌无力患者，并非正常人群个体。虽然常规病理检查显示骨骼肌形成未见异常，但其超微结构及分子结构是否异常不得而知。动物实验显示热休克蛋白基因剔除小鼠的myostatin基因mRNA表达水平明显减少，其常规骨骼肌病理结构与野生型相似，但免疫组化染色证明其串珠素蛋白缺乏[2]。因此，此2例可能系超微结构异常的患者，需进一步深入研究观察。

一项以股四头肌为对象，针对年龄分别为：18～30岁（8例）和80～89岁（6例）的女性的研究显示老年女性的myostatin基因mRNA表达水平高于年轻女性。本组对象的表达与年龄无明显相关性，但按性别分层后，女性亦与年龄无相关性。可能与年龄跨度小，均为青壮年患者（14岁～45岁）有关。文献中青年组表达量约为GAPDH的1.8倍，而老年组约为2.9倍，但本组中表达水平最高者为GAPDH的1.15倍。此差别不除外种族间差异所致，亦可能为所检目标肌肉不同所致[3]。而男性的表达指数与年龄正相关（相关系数0.6855），与病程无明显相关；女性患者的表达与病程成正相关（相关系数0.5799）。提示男性年龄增长或女性病和与myostatin基因表达水平增高的互为因果。

综上所述，本研究结果显示，常规组织病理学结构正常的肌肉组织中myostatin基因mRNA表达水平变异较大。国人的表达水平可能低于高加索人，其表达指数在男性可能与年龄相关，而在女性可能与病程相关。

[1] Maher AC,Fu MH,Isfort RJ,et al.Sex Differencesin G lobalm-RNAContentof HumanSkeletal Muscle[J].PLoS One,2009,4(7): e6335.

[2] Xu Z,Ichikawa N,Kosaki K,et al.Perlecan deficiency causes muscle hypertrophy,a decrease in myostatinexpression,and changes in muscle fiber composition[J].Matrix Biol,2010, 29(6):461-470.

[3] Williamson DL,Raue U,Slivka DR,et al. ResistanceExercise,Skeletal MuscleFOXO3A, and 85-Year-OldWomen[J].J Gerontol A Biol Sci Med Sci,2010,65A(4):335-343.

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1671-8194（2013）27-0151-02