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茶树体细胞胚的形态分析

2012-12-24陈晓玲赵一入江昌俊

茶业通报 2012年1期

陈晓玲,丁 菲,赵一入,江昌俊

(安徽农业大学茶叶生物化学与生物技术教育部重点实验室,合肥230036)

体细胞胚发生作为20世纪后期植物组织培养中的一个重大发现和突破,与植物另一种再生方式即器官分化相比,具有数量多、速度快、结构完整、再生率高等优点[1],在很多领域被广泛应用,如作为稳定、高效的植物再生体系[2]和理想的遗传转化受体体系[3]。植物体胚发生的方式分直接和间接两种:不通过愈伤组织阶段直接从外植体表面或内部细胞产生体细胞胚的方式叫体胚的直接发生。先诱导出愈伤组织(直接诱导胚性愈伤,或由非胚性愈伤再转化成胚性愈伤),体胚由胚性愈伤组织分化产生的方式叫做体胚的间接发生[4]。目前,在茶树的组织培养中,对于体细胞胚发生的过程和不同阶段的形态特征没有详细的报道。本文探究了茶树体细胞胚的发生方式,描述了以茶树子叶为外植体诱导体细胞胚发生的各个阶段的形态学特征,并进行了相关细胞学分析,以期为茶树离体再生和遗传转化的研究提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

舒茶早 [C.sinensiscv.shuchazao]10月中旬的种子,采自安徽农业大学农业园。

1.2 培养基及培养条件

培养基P:MS+0.2 mg·L-1NAA+2.0 mg·L-16-BA+1.0mg·L-1GA3;蔗糖 30 g·L-1,琼脂 0.75%,pH 5.8。白炽灯光照强度 50μmol·m-2·s-1,12h 光照,25±2℃培养。

1.3 体细胞胚的诱导

将采集的种子去除果皮,表面消毒,无菌操作下剥去种皮,将子叶切割成0.5cm2,分为带胚子叶和不带胚子叶两种处理,接种于体细胞胚诱导培养基P中,30d为一周期,继代培养。观察体细胞胚的形成过程。……

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