余 樱 张兆辉 喻志源 王 伟＊

大鼠局灶性脑缺血后不同时间点磷酸化Rb蛋白与凋亡神经元的共定位研究

余 樱 张兆辉 喻志源1王 伟1＊

（武汉大学人民医院神经内科，武汉430060；1华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科，武汉430030）

目的 探讨大鼠局灶性脑缺血后磷酸化Rb蛋白（p-Rb，ser 795）的表达定位与神经元凋亡的时空关系。方法制备大鼠大脑中动脉梗塞（MCAO）模型，分为假手术对照组、缺血1h再灌注12h，1d，3d，7d组。利用TUNEL法检测缺血周边区细胞凋亡情况；TUNEL与p-Rb荧光双标观察神经元凋亡与p-Rb表达、定位的关系。结果 缺血半暗带内大部分TUNEL阳性细胞为神经元；大鼠MCAO再灌注12h和1d，TUNEL与p-Rb分别以重叠和镶嵌的方式共定位；再灌注3d，7d发生p-Rb核浆转移的神经元与TUNEL染色细胞仍然分别维持在高水平，但是两者却没有明显的共定位关系。结论 p-Rb可能参与短暂局灶脑缺血后神经元早期凋亡过程，间接或者不参与神经元晚期凋亡过程。

大脑中动脉梗塞／再灌注；神经元；凋亡；磷酸化Rb

缺血性脑卒中是发病率、致残率和死亡率都很高的中枢神经系统疾病，严重影响了人类生存质量。尽管近几年对缺血后脑组织的病理变化过程的研究不断深入，但是缺血诱导的缺血半暗带内神经元凋亡丢失的潜在机制还没有完全明确。探讨脑缺血损伤后缺血半暗带中神经元凋亡的可能机制对于挽救濒临死亡的神经元、最大程度地保护脑功能尤为重要。

有证据显示细胞周期再进入参与了缺血损伤后神经元凋亡过程［1］。……