于树娜 王宝松 姜红心 史才兴 郑 洁 蒋吉英

Hep G2及其克隆形成细胞端粒酶活性的异质性研究

于树娜 王宝松 姜红心1史才兴 郑 洁2蒋吉英＊

（潍坊医学院解剖学教研室；1潍坊医学院形态学实验室；2潍坊医学院病理学教研室 山东261053）

目的 研究端粒酶在肝癌细胞株Hep G2及其克隆形成细胞中的表达，探讨不同增殖能力的肝癌细胞中端粒酶活性的异质性，为肝癌的诊断以及治疗提供新的思路。方法 利用软琼脂克隆形成实验富集分离人肝癌Hep G2细胞的克隆形成细胞；常规培养Hep G2及其克隆形成细胞，利用免疫细胞化学、Western blotting和RT-PCR检测h TERT蛋白和mRNA在Hep G2细胞及其克隆形成细胞中表达的异质性。结果 ①HE染色显示，克隆形成细胞的胞核较Hep G2细胞大，核仁明显；细胞伸出较多的细长突起，并连接形成网状。②免疫细胞化学染色显示，h TERT在Hep G2细胞的表达以细胞质为主，克隆形成细胞则以细胞核为主。③Western blotting和RT-PCR结果显示，克隆形成细胞中h TERT蛋白质和mRNA的表达均高于Hep G2细胞。结论 ①h TERT在Hep G2细胞及其克隆形成细胞中的表达存在异质性，且在克隆形成细胞中表达较高。②h TERT在Hep G2细胞及其克隆形成细胞中的表达模式提示克隆形成细胞具有肝癌干细胞的特征。

肝癌；h TERT；异质性；肿瘤干细胞

肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发病机制尚不清楚。近年来的一些研究报道，肝癌的发生与肝干细胞有密切的关系［1-3］。但由于缺乏直接的证据，对肝癌干细胞的存在至今尚有争议。本实验室前期研究了肝癌组织和Hep G2细胞在信号传导通路、多药耐药及药敏等方面的异质性［4-6］。……