成 羿 董学亮 王 佩 杭州市中医院 杭州 310007

传统中医药治疗骨骼肌损伤有独特的疗效。本实验观察我院自制活血止痛膏剂外敷治疗兔腓肠肌钝挫伤，并应用RT-PCR检测兔IIb型肌球蛋白重链（myosin heavy chain，MHC）、I型胶原、III型胶原mRNA的表达，探讨活血止痛膏剂对骨骼肌修复的可能作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验药物 活血止痛膏剂（主要药物:片姜黄、赤芍药等，由本院药剂科提炼制成膏剂，高剂量组药物浓度为临床人体使用药物浓度，中剂量组为高剂量组浓度的50%，低剂量组为高剂量组浓度的10%）。青鹏膏（药物组成：棘豆、亚大黄、铁棒锤、诃子、安息香、人工麝香等，西藏奇正藏药股份有限公司，准字号Z54020140）。

1.2 主要试剂 Trizol试剂（上海生工生物工程技术服务有限公司）。HiFi-MMLV cDNA第一链合成试剂盒（北京康为世纪生物科技有限公司）。2×Taq MasterMix（含染料）酶（北京康为世纪生物科技有限公司）。100bp DNA Ladder Marker（TaKaRa宝生物工程（大连）有限公司）。

1.3 实验动物 中国大白兔63只，平均体质量（2.5±0.2）kg，雌雄各半。由浙江中医药大学动物实验中心提供。饲养及取标本皆在该中心完成。实验动物合格证号：SCXK（浙）2008-0036。

1.4 实验方法 参照张静[1]造模方法，并稍加改进。将日本大耳白兔俯卧位固定在解剖台上，在双后肢褪毛，利用重力棒选定腓肠肌肌腹中段做为打击中心（距跟骨6.5cm处）。将打击棒放塑料管中，管下口垂直对准打击部位，重物自由落体下落导致一次打击伤，造成腓肠肌急性挫伤模型。60只造模成功。随机分为活血止痛膏高、中、低剂量组及青鹏膏对照组、外伤对照组，各12只。另取3只设为正常对照组。……