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人参皂苷Rg1抗血管内膜增生与其抗氧化和上调eNOS表达作用的关系

2012-12-06杨丹莉黄燮南

中国药理学通报 2012年3期
关键词:氧化应激模型

高 杨,吴 芹,杨丹莉,邓 江,黄燮南

(贵州省基础药理重点实验室暨遵义医学院药理学教研室,贵州遵义 563000)

经皮腔内冠状动脉介入治疗 (PCI)已成为治疗冠心病的重要手段,然而,PCI术后存在的再狭窄问题却严重影响了其远期疗效[1]。一般认为,血管平滑肌细胞(VSMC)增殖、肥大、迁移是血管术后再狭窄等的病理基础[2]。已有研究表明,人参皂苷Rg1(Rg1)能抑制肿瘤坏死因子-α所致VSMC增殖[3-4]。我们先前的研究也证实,人参总皂苷及Rg1均能抑制球囊损伤所致大鼠颈动脉内膜增厚[5-6],在培养的 VSMC,人参总皂苷对血小板源性生长因子诱导的VSMC增殖也具有抑制作用[7]。然而,VSMC增殖受多种因素的调控,其中,氧化应激[8]和一氧化氮 (NO)形成[9]均明显影响 VSMC增殖。因此,本研究拟观察Rg1的抗血管内膜增生作用与其抗氧化应激和促NO生成的关系。

1 材料与方法

1.1 实验动物 ♂ SD大鼠,清洁级,体质量300~350 g,由第三军医大学大坪医院实验动物中心提供[许可证号:SCXK-(军)2007-017]。

1.2 药品及试剂 Rg1:北京奥明兴业科技有限责任公司提供 (纯度95%);SOD、MDA检测试剂盒(南京建成生物工程研究所);内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、β-actin引物、TRIzol(TaKaRa生物工程公司);逆转录反应体系试剂盒(Applied Biosystems公司);SYBR®GREEN PCR Master Mix(Warrington WA14SR.UK);RNA纯化试剂盒 (上海华舜生物工程有限公司)。

1.3 仪器 Fogarty导管(美国edwards lifescience公司);Leica光学显微镜及照相系统(德国Leica Microsystems Ltd);Mastercycler Gradient PCR仪、Centrifuge 5417R/5415D离心机 (德国Eppendorf公司);icycler荧光定量PCR仪(美国BIO-RAD公司)。

1.4 方法

1.4.1 大鼠颈总动脉球囊损伤模型的制备 大鼠用20%水合氯醛 (2 ml·kg-1)腹腔注射麻醉后仰卧位固定,用碘伏消毒颈部皮肤并作前正中切口,分离左颈总动脉和颈外动脉,用……

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