姜文静，牛膺筠

(1.青岛市海慈医疗集团眼科，山东 青岛 266033;2.青岛大学医学院附属医院眼科，山东 青 岛 266003)

众所周知，适量的光线对视觉的形成是非常必要的。相反，如果光线的强度、光照的时间等超过了视网膜的承受力，那么将会造成视网膜的光损伤。光损伤后视网膜成分的丢失可能涉及凋亡，而Caspase-3是细胞凋亡的的必经之路。重组人促红细胞生成素(rhEPO)可抑制光化学损伤诱导的人RPE细胞的凋亡，对人RPE细胞的光化学损伤有保护治疗作用［1］。本课题建立光损伤模型，应用外源性EPO进行治疗，观察EPO与凋亡、Caspase-3的关系，探讨EPO的保护作用，为其临床应用治疗视网膜光损伤类疾病提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 动物 52只♂BALB/c小鼠，体质量12～20 g，随机分为对照组(4只)、单纯光照组(24只)和EPO预处理组(24只)3组。后两组按光照后处死时间的不同，分为6 h、12 h、36 h、72 h、96 h 和7 d 6 个亚组。

1.2 试剂 3 000 U/ml rhEPO(沈阳三生制药公司)，caspase-3兔IgG多抗(武汉博士德公司)，PV6001二步法免疫组化检测试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)。

1.3 实验方法 将48只BALB/c小鼠放于6000LUX光照箱前，EPO预处理组和单纯光照组小鼠分别腹腔注射rhEPO和等量生理盐水，剂量为5 000 U·kg－1。光照箱由中国海洋大学光学研究室研制。分别于光照后6 h、12 h、36 h、72 h、96 h及7 d处死4只小鼠，摘除眼球，制作石蜡切片。同文献［2］。应用光镜HE染色法观察各组小鼠视网膜色素上皮层形态学的改变，常规免疫组织化学方法检测RPE中Caspase-3的表达变化。

1.4 统计学分析 采用SPSS10.0软件进行统计学分析，数据用±s表示，两组数据比较采用t检验。

2 结果

2.1 HE染色结果 正常BALB/c小鼠视网膜结构层次分明，RPE细胞呈单层线状排列，细胞形态规整。……