猴腺病毒(SAdV)PCR检测方法的建立及初步应用

2012-11-27张荣建贺争鸣

中国比较医学杂志 2012年12期

张荣建，贺争鸣

(中国食品药品检定研究院，卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室，北京 100050)

猴腺病毒(simian adenovirus，SAdV)，是灵长类动物呼吸道和消化道的常见病毒之一，可引起肺炎、咽炎、肠胃炎、结膜炎等，以粪口途径传播为主，主要感染猕猴、非洲绿猴、黑猩猩和狒狒等［1］。SAdV为线性双链DNA病毒，属腺病毒科，哺乳动物腺病毒属。Esona等人发现SAdV在外观无异常的实验猴群中高度流行且感染株系呈广泛的基因多样性［2］，并存在变种传染给人的风险［3，4］，也有报道称在生产用猴肾细胞和脊灰减毒疫苗检定中分离出一些 SAdV 毒株［5］。

目前国内关于SAdV感染流行情况的研究很少，现有检测方法如病毒分离培养等周期长、特异性较差。我们建立的PCR方法能够实现快速批量检测猴群中 SAdV的感染情况，并且灵敏度较高。本方法只需一步PCR就可以将SAdV与鼠腺病毒(MAD)、犬腺病毒(ICH)、禽腺病毒(CELO)区分开来，并且能检出不同亚属的猴腺病毒(SAdV-1、SAdV-3、SAdV-20)。

1 材料和方法

1.1 样品与毒株来源

65份食蟹猴和恒河猴粪便样本采集自国家药物安全评价中心和协尔鑫生物资源研究所。中国医学科学院医学生物学研究所生产的五批口服脊髓灰质炎减毒活疫(批号分别为:990420A，990422A，990423A，990428A，990505A)和北京天坛生物生产的一批脊髓灰质炎减毒活疫苗(批号:20091106)。BSC-1细胞，本实验室保存;阳性对照SAdV-1(VR-195TM)、SAdV-3(VR-1449TM)、SAdV-20(VR-541TM)购自美国 ATCC;鼠腺病毒(MAD)、禽腺病毒(CELO)、犬腺病毒(ICH)均本实验室保存。