韩小花，杜永成，张新日，李 毅

(1.山西省人民医院呼吸科，太原 030001;2.山西医科大学第一医院呼吸科，太原 030001)

支气管哮喘(bronchial asthma)是一种常见的慢性呼吸系统疾病。吸烟与哮喘关系密切，长期吸烟可增加哮喘发作的严重度和病死率。吸烟可改变哮喘患者气道炎症的特点，导致哮喘患者激素治疗效果更差，肺功能下降更快。免疫-炎症机制是近几年支气管哮喘研究的热点，趋化因子的作用亦受到了广泛关注。CCR6是趋化因子CCL20唯一的受体，Lukacs NW［1］和 Bracke KR［2］等人的研究表明CCR6不仅在哮喘气道粘膜免疫中的作用非常重要，而且对于烟草烟雾暴露导致的肺部炎症具有重要作用。本文通过观察烟草烟雾暴露对哮喘大鼠气道CCR6 mRNA及蛋白表达的影响，进一步探究吸烟哮喘气道炎症发生的免疫学机制，以期为临床治疗哮喘寻找新的靶点。

1 材料和方法

1.1 实验材料和设备

6～8周龄清洁级健康雄性Wistar大鼠〔山西医科大学实验动物中心提供，合格证号 SXCK(晋)2009-0001〕40只，平均体重(200±20)g。卵白蛋白(OVA)购自美国 Sigma公司，实验用香烟为湖南中烟工业公司生产的芙蓉牌过滤嘴香烟 (烟碱1.0 mg/支，焦油12.0 mg/支)。兔抗大鼠 CCR6多克隆抗体试剂盒及SABC(兔IgG)试剂盒均购自北京博奥森生物技术有限公司;DAB显色剂购自武汉博士德生物工程有限公司;MIAS-2000医学图像分析系统为四川川大智胜软件股份有限公司产品。第一链cDNA合成试剂盒(RevertAidTMFirst Strand cDNA Synthesis Kit K1622)为加拿大Permentas公司产品;实时荧光定量 PCR仪(Roche LightCycler1.0)为瑞士Roche公司产品。

1.2 方法

1.2.1 动物分组与模型制备:40只大鼠按照随机数字表法分为4组:对照组、烟雾暴露组、哮喘组和哮喘+烟雾暴露组，每组10只。……