Survivin蛋白在舌鳞癌中的表达及意义
2012-11-24徐亚娟金志威张艳秋刘文书
徐亚娟,金志威,张艳秋,赵 春,李 丹,刘文书
(1.吉林省肿瘤医院 口腔颌面甲状腺外科,吉林 长春130012;2.吉林大学第一临床医院口腔科)
Survivin是凋亡抑制蛋白最强的凋亡抑制因子。在多种恶性肿瘤中呈现高表达,作为肿瘤标志物对肿瘤的诊断、治疗和预后判断起一定的作用。舌癌恶性程度高,细胞增殖和细胞凋亡、调控失常是肿瘤发生普遍存在的因素,本研究应用免疫组织化学方法检测Survivin基因在舌癌组织、癌旁组织及正常舌黏膜细胞中蛋白(SVV蛋白)水平的表达,探讨其在舌癌的发生、发展过程中可能的机制作用。
1 材料与方法
1.1 临床资料 收集我院2001年6月-2011年6月舌鳞状细胞癌标本48例。其中男性30例,女18例:年龄为29-71岁,平均50岁。临床分期分别为Ⅰ期7例,Ⅱ期18例,Ⅲ期14例,Ⅳ期9例。病理类型:高分化鳞癌22例,中分化鳞癌17例,低分化鳞癌9例。淋巴结转移情况:颈部淋巴结转移者38例,无颈淋巴结转移10例。另于术中取24例舌正常黏膜为对照组。
1.2 试验方法 所用试剂购自武汉博士德生物工程有限公司。石蜡切片脱蜡和水化后用PBS冲洗。加第一抗体,4℃冰箱过夜,,加生物素标记的二抗,室温下孵育30min,加链亲和素-过氧化物酶,室温下孵育30min。再用PBS冲洗3次加滴新鲜配制的DAB溶液,显微镜下观察,冲洗,苏木素复染。梯度酒精脱水干燥,二甲苯透明,中性树胶封固。细胞爬片固定,余同组织片。
1.3 结果判断 Survivin表现为棕黄色颗粒状或弥漫片状分布判断为阳性,标本中无阳性细胞或反应细胞<10%为阴性,大于10%为阳性。
1.4 统计学分析 应用SPSSl3.0医学统计软件包进行统计分析,两组间比较采用χ2检验。……
