齐 红，刘玉侠，任林广，徐广伟，段北野，赵珍谊

（1.吉林省肿瘤防治研究所，吉林 长春130012；2.长春百克生物科技股份公司，吉林 长春130012）

肿瘤免疫学研究证实，机体功能降低是导致恶性肿瘤发生的主要因素之一，对肿瘤的发生、发展、转移、疗效及预后有直接的影响［1］。抗肿瘤免疫主要是细胞免疫，T淋巴细胞在肿瘤免疫中起中心调控作用［2］。

流式细胞仪结合现代单克隆抗体技术，可同时对单个细胞上的多种参数进行定量定性分析，具有速度快、精度高、准确性好等特点。因而，流式细胞术进行淋巴细胞免疫表型分析已逐渐成为肿瘤临床检验的常规工作之一。

关于恶性肿瘤患者免疫功能的变化已有很多报道［3－8］，本文主要探讨肺癌患者外周血淋巴细胞亚群与性别、年龄及临床分期的关系。对此尚未见相关研究。

1 材料与方法

1.1 标本来源

患者标本：我们收集了本院自2009年以来住院的肺癌患者外周静脉血。其中，男44例，女43例，年龄39－80岁，中位年龄59岁。均经病理或细胞学检查确诊证实，。按TNM分期，Ⅰ期23例，Ⅱ期15例，Ⅲ期23例，Ⅳ期26例。

正常对照组标本：取自长春市中心血站献血员外周静脉血，年龄20－40岁，男性62例，女性38例。

1.2 主要仪器及试剂

流式细胞仪及相关荧光标记单克隆抗体均购自美国BECKMAN COULTER公司。

1.3 方法

采用流式细胞术，通过四色荧光标记进行淋巴细胞亚群的检测，采用CellQuestPro软件分析淋巴细胞群体百分含量。实验步骤简述如下：加入荧光抗体CD45／／483染液5μl于 A管中，CD3／16＋56染液10μl于B管中，向各管内分别加入相对应的细胞样品各100μl，充分混匀，20－25℃条件下避光标记15－20min。……