抑制性ODN对溃疡性结肠炎患者肠黏膜单个核细胞分泌细胞因子的影响
2012-11-24周晓晶刘伯岩杨文颖
孙 鹏,周晓晶,刘伯岩,杨文颖*
(1.吉林省人民医院 消化内科,吉林 长春130021;2.长春中医药大学基础医学院 生物化学与分子生物学教研室,吉林 长春130117)
溃疡性结肠炎(UC)是一种以结直肠黏膜慢性感染导致溃疡为特征的慢性炎症。尽管对该疾病的发病机制研究了很多年,但是至今仍不清楚。目前溃疡性结肠炎的治疗以SASP和糖皮质激素为主,但其疗效欠佳且副作用大。因此急待开发一种新的药物来治疗溃疡性结肠炎。据报道,溃疡性结肠炎的发生与结肠黏膜细胞表达TLR9密切相关[1],当TLR9与细菌的CpG ODN结合后会激活NF-κB途径进而促进免疫细胞和肠黏膜细胞分泌与溃疡性结肠炎发病密切相关的细胞因子IL-8,TNF-α等[2]。因此抑制TLR9与细菌CpG ODN的结合或许是治疗溃疡性结肠炎的一个新靶点。抑制性ODN是TLR9的抑制剂,目前已发现其在系统性红斑狼疮、脓毒血症等一些TLR9过度表达的自身免疫性疾病的治疗研究中显示了巨大的发展潜力[3,4]。但用ODN来抑制溃疡性结肠炎的研究还未见报道。因此本研究将探讨抑制性ODN对溃疡性结肠炎患者肠黏膜固有层单个核细胞细胞因子表达的影响。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 ODNs 纯化的单链寡聚脱氧核苷酸购自日本Takara大连分公司(OPC级,纯度90%,HPLC级,纯度99%)。本研究使用的ODNs序列如下:2216 (5′-GGGGGACGATCGTCGGGGGG-3′),A151 (5′-TTAGGGTTAGGGTTAGGGT-TAGGG-3′)。所有的CpG ODNs被溶于无菌PBS中,紫外分光光度计定量,检测内毒素<0.03EU/mg,符合实验要求,于-20℃冷藏备用。
1.1.2 本研究纳入在吉林省人民医院消化内镜中心经肠镜检查的10例溃疡性结肠炎患者。每例患者各取5块活检组织,立即浸泡于D-Hanks缓冲液中待用。……
