江涛，张恩娟，樊莉，路勇，葛勤

（第三军医大学第二附属医院药剂科，重庆4 0 0 0 3 7）

美速静胶囊的制备及其成型工艺考察

江涛＊，张恩娟，樊莉，路勇，葛勤#

（第三军医大学第二附属医院药剂科，重庆4 0 0 0 3 7）

目的：对原美速静胶囊工艺进行改进，制定质量控制方法，考察成型工艺。方法：采用熔融法将聚乙二醇（PEG）4 0 0 0与褪黑素制成固体分散体，粉碎后加入辅料制成胶囊。采用高效液相色谱法测定褪黑素的含量，考察美速静胶囊的含量均匀度和溶出度，并测定内容物的堆密度、休止角、临界相对湿度。结果：褪黑素检测浓度在4～2 4 μg·mL－1范围内与其峰面积积分值线性关系良好（r＝0.9 9 9 8），平均回收率为9 9.6%（RSD＝0.6 4%）。美速静胶囊的含量均匀度均＜1 5.0，1 0 min内溶出约9 0%。粉末堆密度为0.6 6 g·mL－1，休止角为2 3.8°，临界相对湿度为6 0%。结论：建立的美速静胶囊制备工艺可行，且质量可控。

美速静胶囊；褪黑素；固体分散体；质量控制；高效液相色谱法

褪黑素或称褪黑激素、松果体素，是由大脑松果体分泌的吲哚类激素[1]，具有诱导睡眠、调节生物钟、调节内分泌系统、增强免疫力、抗氧化等生理功能，其水溶性差、半衰期短、生物利用度低[2]。固体分散体能增加水溶性差的药物的溶解度，提高生物利用度，增加其疗效。采用合适的制备方法，药物能以微粒或分子形式均匀分散于基质中，从而保证药物在固体分散体中含量的均一性[3]。美速静胶囊原工艺中是褪黑素与淀粉混合后填充胶囊，二者质量比相差数十倍，不易混合均匀，且粉末流动性不佳。根据褪黑素的理化性质，笔者对工艺进行改进，先将褪黑素与聚乙二醇（PEG）4 0 0 0制成固体分散体，粉碎后细粉与淀粉、助流剂混合，从而使各组分间比例差距缩小，利于混合，且粉末流动性增加。

1 仪器与试药

ME2 3 5 S电子天平（德国Satoris公司）；ZY9 5 1 Q高效液相色谱仪（安捷伦科技有限公司）；L3 2 9 1 2 4电热恒温水浴锅（上海医疗器械五厂）；LD-2 0 0粉碎机（常宏制药机械设备厂）；ZRS-6型智能溶出试验仪（天津大学无线电厂）。

褪黑素（北京嘉康源科技发展有限公司，批号：0 9 1 2 2 8 0 1，纯度：9 9.9%）；PEG 4 0 0 0（武汉鑫恒隆工贸有限责任公司，批号：2 0 0 9 1 0 2 5）；滑石粉（广西龙胜华美滑石开发有限公司，批号：0 9 0 1 2 1）；淀粉（曲阜市药用辅料有限公司，批号：2 0 0 9 1 2 0 2）；美速静胶囊（自制，批号：2 0 1 0 5 0 7、2 0 1 0 5 1 6、2 0 1 0 5 1 9，规格：3 mg·2 5 0 mg－1）；乙腈为色谱纯，水为蒸馏水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 美速静胶囊的制备

采用熔融法制备。称取PEG 4 0 0 0适量，加入到2 5 0 mL烧杯中，7 5℃水浴不断搅拌至PEG 4 0 0 0完全熔融，按处方比例缓慢加入褪黑素（PEG 4 0 0 0-褪黑素（质量比）＝2 5∶1），搅拌1 0 min，使其充分混匀。趁热将含褪黑素的液体倒于干净的玻璃板上，冷却后冻干2 4 h，制成褪黑素固体分散体[4]。取褪黑素固体分散体适量，粉碎过8 0目筛，过筛后粉末备用。按处方比例（固体分散体粉末-滑石粉-淀粉（质量比）＝5.5∶1∶1 0.5），称取褪黑素固体分散体粉末、滑石粉、淀粉适量，混合均匀，2号胶囊填充，即得。

2.2 褪黑素含量测定

2.2.1 色谱条件和系统适用性试验。色谱柱：YMC柱（2 5 0 mm×4.6mm，1 0μm）；流动相：乙腈-水（V/V＝3 0∶7 0），流速：1.0 mL·min－1；检测波长：2 2 3 nm；柱温：2 5℃；进样量：2 0 μL。2.2.2 对照品溶液的制备。精密称取褪黑素5 mg，置5 0 mL量瓶中，用0.1 mol·L－1乙腈溶液溶解并稀释至刻度，混匀，得浓度为0.1 mg·mL－1的对照品贮备液。精密量取5 mL对照品贮备液，置5 0mL量瓶中，用0.1mol·L－1乙腈溶液稀释至刻度，混匀，得浓度为0.0 1 mg·mL－1的对照品溶液。

2.2.3 供试品溶液的制备。取美速静胶囊2 0粒，倾出内容物，研细，精密称取2 5 mg，置2 5 mL量瓶中，加0.1 mol·L－1乙腈溶液溶解并稀释至刻度，过滤，即得。另取缺褪黑素的样品，同法制得阴性供试品溶液。

2.2.4 专属性试验。精密吸取对照品、供试品及阴性供试品溶液各2 0μL，按“2.2.1”项下色谱条件注入色谱仪。结果表明，阴性供试品溶液对褪黑素测定无干扰，色谱见图1。

Fig 1HPLC chromatogramA.negative control；B.reference substance；C.test sample；1.melatonin

2.2.5 线性关系考察。精密量取“2.2.2”项下对照品贮备液1、2、3、4、5、6 mL，置2 5mL量瓶中，加0.1 mol·L－1乙腈溶液稀释至刻度，分别取2 0 μL注入色谱仪测定峰面积。结果，以检测浓度为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y）进行线性回归，得回归方程为：Y＝4 5 4 6.0 7 9 9 2 X－1 7.4 2 8 7（r＝0.9 9 9 8），褪黑素检测浓度线性范围为4～2 4 μg·mL－1。

2.2.6 精密度试验。取对照品溶液2 0 μL注入色谱仪，按“2.2.1”项下色谱条件，分别进样6次，记录色谱图，测定峰面积，考察日内精密度；连续5 d进样，记录峰面积，考察日间精密度。结果，日内RSD＝0.9%，日间RSD＝1.0 5%，表明精密度良好。

2.2.7 稳定性试验。取同一份供试品溶液，按“2.2.1”项下色谱条件，分别于0、1、2、5、7、9 h进样2 0 μL，测定峰面积，记录色谱图。结果，RSD＝0.7 5%，表明褪黑素在9 h内稳定性良好。2.2.8 重复性试验。取供试品溶液6份，按“2.2.1”项下色谱条件，测定峰面积并计算褪黑素含量。结果，褪黑素平均含量为9 9.8 0%，RSD＝0.5 6%。

2.2.9 回收率试验。精密称取已知含量的美速静胶囊内容物9份（每份约2 5mg），分别加入对照品贮备液，置2 5mL量瓶中，加0.1 mol·L－1乙腈溶液溶解并稀释至刻度，过滤，制备成高、中、低浓度溶液各3份，按“2.2.1”项下色谱条件测定峰面积，计算回收率，结果见表1。

2.2.1 0 样品含量测定。取3批美速静胶囊（批号：2 0 1 0 5 0 7、2 0 1 0 5 1 6、2 0 1 0 5 1 9）适量，按“2.2.3”项下方法制得供试品溶液，按“2.2.1”项下色谱条件测定，并计算样品中褪黑素含量。结果含量分别为9 9.8 0%、9 8.3 1%、9 9.5 9%，A+1.8 0 S（A：均值差的绝对值，S：标准差）分别为5.6、6.3、6.1，均＜1 5.0。

2.2.1 1 含量均匀度[5]。取美速静胶囊1 0粒，分别倾出内容物，置烧杯中，加0.1 mol·L－1乙腈溶液溶解后转移至5 0 mL量瓶中，稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取2 0 μL，注入色谱仪，按“2.2.1”项下色谱条件测定并计算。结果3批样品含量均匀度均符合规定。

2.2.1 2 溶出度测定[5]。取美速静胶囊6粒，照2 0 1 0年版《中国药典》（二部）附录ⅩC第一法（篮法）测定溶出度，以9 0 0mL 2%十二烷基硫酸钠为溶出介质，温度（3 7±0.5）℃，转速1 0 0 r·min－1，于1、3、5、1 0、1 5、2 0、3 0、4 5 min取样5 mL，同时补加等温介质5 mL，样品经0.8 μm微孔滤膜过滤，按“2.2.1”项下色谱条件测定，计算累积溶出度，结果见图2。

表1 回收率试验结果Tab 1 Results of recovery tests

图2 美速静胶囊中褪黑素的溶出曲线Fig 2 Dissolution curves of melatonin in Meisujing capsule

2.3 成型工艺考察

2.3.1 堆密度[6]。堆密度测定采用量筒法。取美速静药粉5 g，精密称定，置量筒中，手持量筒由5 cm高处落在塑胶板上，反复5次，测定容积，共测定5次，以堆密度＝药粉质量（g）/容积（mL）计算，结果见表2。粉末的平均堆密度为0.6 6 g·mL－1，与原工艺相比明显增加，更符合制剂要求。

表2 胶囊中粉末的堆密度和休止角测定结果Tab 2 Results of bulk density and angle of repose of powder in capsules

2.3.2 流动性[6]。采用固定漏斗法测定休止角。取半径为4 0 mm的平底圆皿，将漏斗固定于三角架上，下端正对平底圆皿的圆心，高1 5 cm，取美速静药粉使之从漏斗上自然流下，至锥形周边到平底圆皿边缘为止，测定锥体高度H，计算公式tgα＝H/R，结果见表2。一般认为休止角＜3 0℃，表明摩擦力小，流动性好。由表2的结果可知，工艺改进后平均休止角为2 3.8°，表明粉末的流动性好。

2.3.3 吸湿百分率的测定[7]。将底部盛有氯化钠过饱和溶液的干燥器，放入2 5℃恒温箱内，平衡2 4 h，使干燥器内的相对湿度（RH）达到7 5%，放入装有适量美速静药粉的称量瓶（厚度约为1 mm），于0、6、1 2、2 4、3 6、4 8、7 2 h称定重量，以吸湿百分率＝（吸湿后药粉重量－吸湿前药粉重量）/吸湿前药粉重量×1 0 0%计算。以吸湿百分率为纵坐标，时间为横坐标作图，即得吸湿曲线，结果见图3。

图3 胶囊中药粉的吸湿曲线Fig 3 Curve of moisture absorption in powder of capsules

由图3可知，在暴露1 2 h后，药粉吸湿百分率显著增加，因此要避免长时间暴露于空气中，填充过程最好控制在1 2 h以内。2.3.4 临界相对湿度（CRH）的测定[8～10]。分别取粉末适量，平铺于称量瓶中（厚度约为1 mm），恒重后精密称定，放置于由不同浓度硫酸溶液和饱和盐液制成的不同湿度的干燥器中，RH分别为1 8.5%、3 3.0%、4 2.7 6%、5 9.2%、6 5.0%、8 5.0%，于2 5℃恒温箱中放置9 6 h，取出，精密称定重量，计算各RH下的吸湿百分率。以吸湿百分率为纵坐标，RH为横坐标作图，得吸湿曲线，结果见图4。

图4 不同相对湿度下胶囊中药粉的吸湿曲线Fig 4 Moisture absorption curves under different relative humidity in powder of capsules

由图4可见，药粉在RH 6 0%时吸湿明显增加，故胶囊中药粉的CRH为6 0%，在实际操作中可参考此值对车间的RH进行控制，以免吸湿使产品的含水量过高而影响质量。

3 讨论

固体分散体通常有2种制备方法，即熔融法和溶剂法。溶剂法在制备过程中会使用大量有机溶剂，这些有机溶剂可能会带入制剂中，有害人体健康[4]。因此笔者选用熔融法制备固体分散体：先将PEG 4 0 0 0加热熔融成液态，再与褪黑素混合，保证了固体分散体中褪黑素含量的均匀性，后再与辅料物理混合，从而使各组分间比例差距缩小，易于混合，含量均匀度试验也证明了美速静胶囊内容物是混匀的。

笔者在试验中发现美速静胶囊内容物长时间暴露于空气中会迅速吸湿，这主要是因为PEG 4 0 0 0为亲水性材料，易吸湿；此外，淀粉中含水量也较高，因此淀粉在使用前必须先烘烤，以去除水分。胶囊填充过程要严格控制湿度，控制人员的出入，尽量缩短填充时间，减少在空气中的暴露。

[1] Pandi-Perumal SR，Trakht I，Srinivasan V，et al.Physiological effects of melatonin：role of melatonin receptors and signal transduction pathways[J].Progress in Neurobiology，2 0 0 8，8 5（3）：3 3 5.

[2] Zhdanova IV.Melatonin as a hypnotic：Pro[J].Sleep Medicine Reviews，2 0 0 5，9（1）：5 1.

[3]Arias MJ，Moyano JR，Ginés JM.Study by DSC and HSM of the oxazepam-PEG 6 0 0 0 and oxazepam-D-mannitolsystems：Application to the preparation of solid dispersions[J].Thermochimica Acta，1 9 9 8，3 2 1（1-2）：3 3.

[4] Bley H，Fussnegger B，Bodmeier R.Characterization and stability of solid dispersions based on PEG/polymer blends[J].Int J Pharm，2 0 1 0，3 9 0（2）：1 6 5.

[5] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）[S].2 0 1 0年版.北京：中国医药科技出版社，2 0 1 0：附录ⅩE、ⅩC.

[6] 张红果，张汝学，贾正平，等.地黄寡糖胶囊成型工艺[J].中国实验方剂学杂志，2 0 1 0，1 6（4）：9.

[7] 李奉勤，范文成，史冬霞，等.止嗽颗粒成型辅料的筛选与工艺研究[J].中国药房，2 0 0 7，1 8（1 5）：1 1 5 0.

[8] 梅建宏.肝舒胶囊的成型工艺研究[J].中国生化药物杂志，2 0 1 1，3 2（2）：1 4 3.

[9] 王秀良，向大雄，赵绪元.不同赋形剂及配方对中药喷雾干燥浸膏粉制粒的影响[J].中成药，2 0 0 2，2 4（2）：9 0.

[1 0] 周 滢，谭 澈，段 恒.石斛明目胶囊成型辅料的选择与工艺研究[J].中华中医药杂志，2 0 1 1，2 6（2）：3 6 7.

Study on Preparation and Forming Technology of Meisujing Capsule

JIANG Tao，ZHANG En-juan，FAN Li，LU Yong，GE Qin
（Dept.of Pharmacy，The Second Affiliated Hospital of Third Military Medical University，Chongqing 4 0 0 0 3 7，China）

OBJECTIVE：To improve preparation process of Meisujing capsules，to establish its quality control method and to investigate forming technology.METHODS：Meisujing capsule was prepared using the excipient and Melatonin solid dispersion which was prepared by hot melting method using melatonin and PEG 4 0 0 0.The content uniformity was studied，and the content and dissolution rate of melatonin in Meisujing capsule were measured by HPLC.The bulk density，angle of repose and critical relative humidity（CRH）were investigated.RESULTS：The linear range of melatonin was 4～2 4 μg·mL－1（r＝0.9 9 98）with an average recovery of 9 9.6%（RSD＝0.6 4%）.The content uniformity of melatonin in 3batches of Meisujing capsule was lower than 1 5.0.The dissolution rate was nearly 9 0%in 1 0min.Its bulk density was 0.6 6g·mL－1，the angle of repose was 2 3.8°，and CRH was 6 0%.CONCLUSION：Established technology of Meisujing capsule is feasible and controllable in quality.

Meisujing capsule；Melatonin；Solid dispersion；Quality control；HPLC

R9 4 4.5

A

1 0 0 1-0 4 0 8（2 0 1 2）3 3-3 1 1 4-0 3

DOI1 0.6 0 3 9/j.issn.1 0 0 1-0 4 0 8.2 0 1 2.3 3.1 6

＊药师，硕士。研究方向：医用新材料和中药制剂开发。电话：0 2 3-6 8 7 7 4 7 1 6。E-mail：zhongyaozhijishi@yahoo.com.cn

#通讯作者：副主任药师。研究方向：中药制剂研发。电话：0 2 3-6 8 7 7 4 7 1 6。E-mail：zhongyao2 0 0 7@yahoo.com.cn

2 0 1 1-0 9-0 3

2 0 1 1-1 0-1 5）