吕 粤，岳 亮，吕素珍

(1.云南省动物疫病预防控制中心，云南 昆明 650051;2.玉溪市动物卫生监督所，云南 玉溪 653100)

鸡败血支原体(Mycoplasmagallisepticum，MG)是引起鸡群感染慢性呼吸道传染病，危害养鸡业发展的主要病原之一，在集中饲养的鸡群中最容易发生流行。该病病程长，呈慢性经过，发病率高，感染此病后，幼鸡生长不良，蛋鸡产蛋下降，给养殖户造成严重的经济损失。被世界卫生组织(OIE)列为B类传染病。诊断及防治该病，对养禽业的健康发展有着重要意义。本文通过血清MG抗体检测对云南省鸡败血支原体的感染情况进行了初步分析，并提出MG的综合防控措施。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 鸡败血支原体抗体检测试剂盒

含鸡败血支原体抗原包被板、阴阳性对照血清、酶标二抗、样品稀释液、TMP底物溶液、终止液。由北京爱德士元亨生物科技有限公司提供。试剂盒批号:050119－600DZ。

1.1.2 仪器

酶标仪(图安Biocellht2)，单道微量可调移液器，多道微量可调移液器，Sigma恒低温高速离心机。

1.1.3 待检鸡血清

从12个地州市抽样采集非免疫鸡血清1245份，血清清亮，不溶血，不腐败，冷冻保存。

1.2 操作步骤

(1)取预包被的微孔板，加入未稀释的阴性对照血清至A1和A2孔。加入未稀释的阳性对照血清至A3和A4孔。加入以样品稀释液1∶500稀释的待检样品至相应的孔，每孔加100μL，轻轻振匀孔中样品，置37℃温育30min。

(2)用大约350μL蒸馏水或去离子水洗涤微孔3～5次。

(3)每孔加酶标二抗100μL，置37℃孵育30min。

(4)洗涤3次，方法同上。

(5)每孔加底物显色液 TMB100μL，在室温下孵育15min。

(6)每孔加100μL终止液终止反应。

2 结果

2.1 结果判定

样品的S/P值小于或等于0.5，判为阴性;样品的S/P值大于0.5，判为阳性。……