许 华， 苏本金， 江海香， 黄亚东

(暨南大学1药学院，2医药生物技术研究开发中心，广东广州510632)

原发性移植物无功能(delayed graft function，DGF)一直是器官移植界多年来未能解决的问题。近年来，有学者发现器官在体外低温保存期间失去了正常存在于血浆中的营养因子(trophic factors，TFs)对细胞的营养和支持作用，这可能与DGF的发生有关［1］。此后，新型营养因子保存液逐渐成为器官保存液研制的一个热门方向［2－3］。酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor，aFGF)作为营养因子的重要成员，具有创伤修复、神经调节、神经保护和内脏保护等活性，对缺血再灌注脏器起到很好的保护效果［4－5］。本研究采用低温保存模型，以临床常用的高渗枸橼酸盐腺嘌呤(hypertonic citrate adenine，HCA)溶液作为对照，研究aFGF对供肝的保存效果。

材料和方法

1 药品与溶液的配制

重组人 aFGF14－154，浓度为 0．126 g/L，比活性 8．3 × 108U/L，由暨南大学医药生物技术研究开发中心研制。HCA液，配方为 K+80 mmol/L，Na+80 mmol/L，MgSO441 mmol/L，枸橼酸55 mmol/L，腺嘌呤 0．38 mmol/L，甘露醇 30 g/L，pH 值7．0 ± 0．1，渗透压为380 mOsm/L。aFGF复方保存液，即在HCA保存液中加入aFGF14－15440μg/L。考马斯亮蓝(Coomassie brilliant blue，CBB)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase，ALT)及天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase，AST)试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品。

2 动物与分组

健康雄性Wistar大鼠24只，体重180～200 g，清洁级动物，购自中山大学医学院实验动物中心。随机分为单纯HCA保存液组(对照组)和aFGF复方保存液组(实验组)，每组12只;根据离体肝脏保存的不同时间，再分为2个亚组，每组6只。

3 大鼠离体肝脏单纯低温保存模型的制备

实验前大鼠禁食不禁水12 h，实验时用10%水合氯醛按3 mL/kg腹腔注射麻醉，仰卧位固定。手术，游离左肾静脉水平以下的腹主动脉结扎阻断，在肾脏动脉下方1．5 cm处的腹主动脉插入留置针并固定，利用三通注射含100 U肝素生理盐水1 mL，完毕后开始灌注单纯HCA液或aFGF复方保存液。……