河北省新乐市羊梨形虫分子检测
2012-10-10陈丽凤张香斋王秋悦刘朋朋王思伟邹亚学
陈丽凤,张香斋,王秋悦,刘朋朋,王思伟,邹亚学
(河北科技师范学院动物科技学院,河北省预防兽医学重点实验室,河北秦皇岛,066600)
梨形虫病是一类经硬蜱传播,由梨形虫纲巴贝斯科或泰勒科原虫引起的血液原虫病的总称。迄今为止,全世界已记载的各种哺乳动物的巴贝斯虫有67种,泰勒虫有13种[1]。羊梨形虫病是世界性分布的严重危害养羊业发展的一类重要疾病。该病主要呈地方性流行,危害严重,可引起羔羊和外地引进羊大量死亡,使慢性发病的羊发育迟缓,产肉量和产毛量显著下降,从而给养羊业造成重大经济损失[2,3]。笔者对采自河北省石家庄地区新乐市某羊场的羊进行梨形虫检测,以便了解和掌握该地区羊自然感染梨形虫情况,为预防该病提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试验动物 31只小尾寒羊,引自河北省新乐市某羊场。
1.1.2 主要试剂 PCR相关试剂,2×Taq MasterMix(北京康为世纪生物科技有限公司);PCR所用引物,GoldViewTM核酸染料,DM2000,血液基因组提取试剂盒,由北京赛百盛生物技术有限责任公司提供与合成。
1.1.3 仪器设备 高压灭菌器(YXQ-LS-18SI,上海博迅实业有限公司),超纯水纯化系统(Milli-Q Gradient,法国Millproe),电子分析天平(YP601N,上海天平厂),超级恒温水浴箱(601型,金坛市医疗仪器厂),高速台式离心机(TGL-16G,上海安亭科学仪器厂),可调微量移液器(0.5 ~10 μL,10 ~100 μL,100~1 000 μL,德国普兰德),PCR 仪(Mastercycler gradient,德国 Eppendorf公司),微波炉(MC-2480EGR,青岛海尔集团),双稳定时电泳仪(DYY-6C型,北京六一仪器厂),凝胶成像分析系统(BIO-BEST200E,美国SIM)。以上仪器设备均由河北省预防兽医学重点实验室提供。……
