刘展 袁春丽 李青凤 汪水城 王本旭

（1.北京市怀柔区妇幼保健院，北京 101400；2.北京军区疾病预防控制中心，北京 100042）

支原体肺炎是肺炎支原体（mycoplasma pneumoniae，MP）引起的肺炎。支原体肺炎起病缓慢，患者有发热、阵发性刺激性咳嗽、少量黏液性或黏液脓性痰。支原体肺炎多发于青少年，患病率占肺炎的15%～30%[1]。目前临床治疗支原体肺炎的常用药物包括阿奇霉素、红霉素等[2]。本研究旨在通过探讨MP临床分离株对临床常用抗生素的敏感性，为临床治疗支原体肺炎提供用药依据。

1 资料与方法

1.1 材料 乳糖酸阿奇霉素（东北制药集团沈阳第一制药有限公司，0.25 g，25万 U／瓶），头孢呋辛钠（Esseti Farmaceutici s.r.l，Italy，0.75 g／瓶），头孢曲松钠（上海罗氏制药有限公司，0.5 g／瓶），青霉素（石家庄制药集团有限公司，1 g／瓶）；美洛西林（华北制药有限公司，1 g／瓶）；乳糖酸红霉素（湖南中南科伦药业有限公司，0.25 g／瓶）；支原体培养基CM0401、CM0403、SR0059和 SR0060C（Oxoid公司，United Kingdom）；核酸分子量标准 DL2000 DNA Marker（大连宝生物工程有限公司）。

1.2 研究方法

1.2.1 双向培养基制备 100 mL蒸馏水中加入3.55 g CM0401，121℃高压灭菌15 min，每个15 mL培养管中加入1 mL灭菌后的CM0401培养基，自然凝固。取1支SR0060C，加入20mL蒸馏水溶解。向每个培养管中加入2 mL SR0060C，4℃保存备用。

1.2.2 咽拭子标本选择性培养与鉴定 将咽拭子标本浸入双向培养基中，37℃培养2周左右。当培养基颜色由红色转变为橙黄色时，将培养液于MP固体培养（CM0403＋SR0059＋琼脂粉）上划板培养，直至镜下看到“油煎蛋”样菌落长成为止。挑取菌落于双相培养基中继续培养，观察培养基颜色变化。

1.2.3 MP的PCR鉴定方法 支原体核酸提取方法参照 DNeasy Blood and Tissue Kit（Qiagen，Cat No：69504）说明书进行。引物参照文献[3]设计如下：上游引物为5’—GGGAGCAAACAGGATTAGATACCCT-3’；……