周 卿，周旭美，杨 杰，陈芳路

(1.遵义医学院 药学院药物分析教研室，贵州 遵义 563099;2.遵义医学院 药学院08级学生，贵州 遵义563099)

阿米卡星(amikacin，AMK)是易溶于水的第三代半合成氨基糖苷类抗生素，具抗感染作用，是临床常用强效广谱抗生素。它的优点在于耐药性低和抗菌效率高，但其具有一定的肾毒性和耳毒性，临床上应用时应尽可能进行血药浓度监测。但阿米卡星无特征紫外吸收基团，文献［1～4］多采用微生物法、经柱前衍生的高效液相色谱法或HPLCELSD 方法，目前也有报道采用 HPLC － RSL［5，6］联用方法检测阿米卡星制剂中的含量，但体内样品研究未有报道，本论文研究采用HPLC－RSL联用方法检测家兔血浆中阿米卡星的含量，方法灵敏度高，选择性好，专属性强，适用于阿米卡星在生物体内药物浓度的检测。

1 仪器与试剂

Agilent 1100全自动高效液相色谱仪(包括G1311A四元泵，G1311A四元泵，G1321A荧光检测器，美国安捷伦公司)，VARIAN Cary Eclipse荧光分光光度计(美国瓦里安公司)，TGL16M台式高速冷冻离心机(长沙迈佳森仪器设备有限公司)，家兔购于遵义医学院动物饲养中心。

阿米卡星标准品(批号:130335－200204，中国药品生物制品检定所)，阿米卡星注射液(天津药业焦作有限公司)，达旦黄(国药集团化学试剂厂)，甲醇和乙腈均为色谱纯(德国迪玛有限公司)，其他试剂为分析纯，实验所用水为重蒸水。

2 方法

2.1 HPLC－RSL联用方法原理及装置 在普通荧光分光光度计上测定分析物和探针溶液所形成离子缔合物的共振散射光光谱，确定共振波长。样品的分离在高效液相色谱仪上完成，另增加一个高压泵用于在色谱柱后输入探针溶液，被分离后的样品溶液和探针溶液在柱后三通阀中混匀后进入反应管，发生离子缔合反应，产生的RSL光谱由荧光检测器在线检测。……