龟鹿二仙胶及其拆方对豚鼠软骨细胞Ⅱ型胶原合成的影响※
2012-09-16黄远鹏李奕修王和鸣
● 黄远鹏 李 楠 杜 江 李奕修 王和鸣
骨性关节炎(ostcoarthritis,OA),又称骨关节病,肥大性关节病,增生性关节病,是一种以软骨外基质缺失及异常重建的退行性疾病[1-2]。其结构性变化特征包括:逐渐丧失关节软骨,在关节边缘骨赘的形成和软骨下骨囊肿的发展[3-5]。OA在中医理论中属于“痹证”中“骨痹”范畴,以肝肾亏虚为其根本,故治疗上,补肝肾之虚,扶正固本为其治疗原则。临床研究中发现,龟鹿二仙胶能够有效的减轻OA患者的症状,改善其关节功能[6]。前期研究发现,龟鹿二仙胶能够有效的促进SD大鼠及豚鼠软骨细胞的增殖,抑制SD大鼠软骨细胞的凋亡,能够促进豚鼠软骨细胞蛋白多糖和Ⅱ型胶原的合成[7-9],验证了龟鹿二仙胶的补虚作用对OA的影响。本实验针对人参枸杞在方中配伍的意义而设计,具体报道如下。
1 材料
1.1 主要试剂 DMEM培养基(低糖)、PBS缓冲液、胎牛血清、胰蛋白酶(Hyclone)、Ⅱ型胶原酶(Sigma)、兔超敏二步发免疫组化检测试剂盒、浓缩型DAB染色试剂盒(中衫金桥)、Rabbit Anti-Collagen Type II(Abcam)。
1.2 主要仪器设备 二氧化碳培养箱(Heal Firce公司212 UV型)、超净工作台(苏净安泰)、倒置显微镜(OLYMPUS IX70型)、万能研究级显微镜(OLYMPUS)、显微图像处理系统(Motic Imges Advance 3.2)、数码医学图像分析系统(Motic Med 6.0)(麦克奥迪)。
1.3 实验动物 健康1月龄清洁级雄性Wistar大鼠50只,体重190~210g,实验动物许可证号:SCXK(沪)2007-0005;合格证号:0069141。3月龄清洁级豚鼠4只(实验动物许可证号:SCXK(沪)2007-0005),以上动物均由上海斯莱克实验动物有限公司提供。
1.4 实验药物 龟鹿二仙胶由龟甲胶(1∶1)、鹿角胶(1∶1)、人参(1∶5)、枸杞(1∶3)四味中药组成,均为农本方中药配方颗粒,生产批号:龟甲胶A101209-01,鹿角胶 A100010-01,人参 A101134-02,枸杞A100873-02。……
