烟草野火病拮抗生防菌的筛选、鉴定与应用
2012-09-14孙宏伟杨晓敏孙剑萍
孙宏伟,元 野,杨晓敏,孙剑萍*
1.牡丹江烟草科学研究所,黑龙江省牡丹江市西地明街63号 157011
2.东北农业大学,哈尔滨市香坊区木材街59号 150030
由Pseudomonas syringae pv.tabai引起的烟草野火病是烟草上的主要叶部细菌病害,该病最早发现于美国的弗吉尼亚和北卡罗莱纳州,现已广泛分布于26个产烟国家和地区,造成了较严重的经济损失。目前该病主要用农用链霉素进行防治,品种较为单一,且经过连续多年的应用,病菌已产生抗药性。为经济有效地控制该病的发生与危害,对烟草内生拮抗野火病细菌进行筛选,既可以抑制病害,保护烟株,又可以防止由于化学农药的长期大量使用产生的“3R”问题,起到防病增产的效果[1-5]。为此,从烟草叶片中筛选出对烟草野火病菌(Pseudomonas syringae pv.tabaci)有显著抑制作用的拮抗菌株,通过16S rDNA确定拮抗菌的分类地位,测定其对烟草叶片内主要防御酶活性的影响,并对烟草成苗期野火病进行防治效果测定,旨在为新型生物农药的开发奠定基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试烟草品种为龙江911。供试病原菌为烟草野火病菌Pseudomonas syringae pv.Tabai,由本所分离、鉴定并保存。
供试培养基(NA):牛肉膏3.0 g,蛋白胨5 g,葡萄糖2.5 g,琼脂粉15 g,蒸馏水1 L,pH 7.0~7.2。
试验于2009年至2010年进行,地点设在牡丹江烟草科学研究所试验场(宁安市范家乡)烟田。试验育苗在大棚内进行,托盘育苗,塑料盘规格:45 cm×65 cm(120孔)营养土为山皮土、砂子、腐熟猪粪以1∶1∶1配比,高温熏蒸灭菌。大田试验烟苗5月10日移栽,按当地生产技术规范进行田间管理。
