蔡刘体 ，商胜华 ，胡重怡 ，王丽丽 ，刘艳霞 ，汪汉成 ，杨兴明 ，石俊雄*

1.贵州省烟草科学研究所，贵阳市金阳新区云潭北路 550081

2.南京农业大学资源与环境科学学院，南京市卫岗童卫路1号 210095

烟草青枯病是烟草的重要病害之一，几乎分布于世界上所有的烤烟种植区，其中热带和亚热带烟区发病尤为严重［1］。在我国，烟草青枯病是危害南方烟区烟叶生产的主要病害，一旦发病往往会造成整株死亡，造成重大经济损失［2-3］。目前，在烟叶生产过程中尽管采用化学药剂防治［4-6］、生物防治［7-9］、合理轮作［8，10-11］、种植抗病品种［12-14］、调整土壤微生物和调整烟苗移栽期等综合措施来防治烟草青枯病［15］，但仍无法有效控制该病的发生。在烟草青枯病生物防治研究方面，目前主要是利用青枯菌的拮抗微生物来防治烟草青枯病，虽然筛选拮抗微生物及其在实验室或温室中拮抗试验效果不错的研究报道较多［16-18］，但是在大田生产上却鲜有应用成功的报道。主要原因之一是植烟土壤是一个复杂的生态系统，耕作层土壤中微生物众多，包含细菌、真菌和病毒等,其微生物的多样性和复杂性对青枯菌的拮抗微生物定殖和扩繁有一定影响。因此，分析烟草青枯病土壤中微生物的群落结构，将有利于拮抗微生物的定殖、扩繁和拮抗作用的发挥。目前，对土壤微生物群落的分析，尤其是快速分析非常困难［19］，随着分子生物学和生物信息学的快速发展以及PCR（Polymerase Chain Reaction）技术的日趋成熟，一些建立在 PCR技术……