李白翎 金磊 钟铿 杜大海

水通道蛋白（aquaporins, AQPs）是一组分子量约30 kDa的（单体）疏水性膜转运蛋白，属于主要固有蛋白（major intrinsic protein, MIP）家族[1]。近年来，AQPs的表型及临床病理相关研究取得了重大进展[2]。其中AQPs的染色体定位、基因结构、表达调控、蛋白构象、组织分布和生理功能方面研究较为深入，但AQPs功能对肿瘤的影响至今尚未明确。最近研究[3]发现AQP3在肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移和血管生成中发挥了重要的作用。已有研究[4]证实AQP3在多种不同来源的肿瘤中表达水平较高，尤其是在侵袭性强的肿瘤中。但AQP3在非小细胞肺癌（nonsmall cell lung cancer, NSCLC）组织中的表达及与临床病理参数间的关系，国内外鲜有报道。本研究应用免疫组化法检测NSCLC中AQP3的表达情况，并分析其与微血管密度（micro vascular density, MVD）及临床病理参数间的相关性，为进一步研究AQP3在NSCLC发生、发展中的作用机制提供依据。

1 对象与方法

1.1 对象 选取2006年1月-2006年12月上海长海医院胸心外科手术切除的NSCLC标本180例，术前未行任何抗肿瘤治疗；其中男性117例，女性63例。患者年龄43岁-79岁，平均年龄54.7岁。病理分型为鳞癌64例，腺癌99例，大细胞癌10例，其它病理类型7例。所有标本均经过病理组织学诊断证实，癌旁组织作为对照组。

1.2 方法

1.2.1 主要试剂 AQP3免疫组化试剂盒购自美国 Santa Cruz公司；即用型SABC试剂盒及DAB显色剂购自武汉博士德公司，CD34单克隆抗体购自美国Santa Cruz公司。

1.2.2 免疫组织化学分析 免疫组化染色采用SABC（streptavidin-biotin complex）法，高温抗原修复，染色程序参照说明书进行。用已知阳性切片作为阳性对照，用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照。

1.3 结果判定 采用双盲法，由两位病理科医师分别读片。……