吲哚-3-甲醇对肺癌细胞放射敏感性的EGFR依赖性调节
2012-09-11肖骁孟庆慧徐加英焦旸EliotRosen樊赛军
肖骁 孟庆慧 徐加英 焦旸 Eliot M Rosen 樊赛军
近年来我国肺癌的发病率和死亡率迅速上升,已处恶性肿瘤的首位。虽然不同的治疗方法和技术已不断发展和完善,但肺癌的5年生存率的改善仍然不明显。放射治疗是最常用于肺癌的治疗方法之一,其常在手术前后作为辅助治疗手段应用,在一定程度上可以减少局部复发率、明显改善症状、延长患者的生存期。但是肺癌细胞对放射治疗产生耐辐射效应常常降低了放射治疗的疗效和广泛的应用。影响肺癌放射治疗疗效的因素除了放射治疗方法、肺癌临床分期和病理类型、患者免疫状态等因素外[1],药物和饮食也同样可以影响放射治疗的疗效。本实验研究了十字花科蔬菜中研究最多和最重要的一种抗肿瘤成分吲哚-3-甲醇(indole-3-carbinol, I3C)对肺癌细胞放射敏感性的影响及其与表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)的调节关系。
1 材料与方法
1.1 肺癌细胞培养及试剂 3种肺癌细胞系来自美国Georgetown大学组织和细胞实验中心。培养基为含10%小牛血清的RPMI-1640(Life Technology, USA)。吲哚-3-甲醇(I3C)购置于美国Sigma公司,并溶解在纯度大于99%的二甲基亚砜(DMSO)中,配制成20 mmol/L的储存液存于-20oC备用。
1.2 细胞照射 将指数生长的不同肺癌细胞分为I3C+γ-射线照射组和DMSO+γ-射线照射组,前者为肺癌细胞在5 μmol/L I3C作用24 h后,后者为肺癌细胞在同量的DMSO(作为对照)作用24 h后,在室温下进行γ-射线照射。照射采用137Cs γ-射线照射源进行,剂量率为0.85 Gy/min。
1.3 MTT方法 取对数生长期的细胞,酶消化,接种于96孔培养皿中,24 h后细胞密度大约为40%-50%。除去培养液,加已加入了5 μmol/L I3C的培养液至相应的细胞孔中。……
