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姜黄素对帕金森病多巴胺能神经元保护作用的实验研究

2012-09-07于嵩王玥王旭

中国医科大学学报 2012年6期
关键词:小鼠实验

于嵩,王玥,王旭

(辽宁中医药大学基础医学院解剖组胚教研室,沈阳 110847)

帕金森病 (Parki nson′sdi sease,PD)是一种中枢神经系统的退行性疾病,以黑质部位的多巴胺能神经元变性坏死为主要病理特征。随着人们生活水平的提高和人口老龄化的加剧,PD已成为第四大致死疾病。因此,解析PD的发病机制以及寻找神经退行性疾病的治疗策略已经成为神经科学领域的一个热点。

姜黄素为常用传统中药,由于其安全性高且毒副作用小,且具有多方面的药理作用机制,近年来广泛用于治疗神经退行性疾病。本研究采用 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-m et hyl-4-phenyl-1,2,3,6-t et rahydropyri dine,M PTP)诱导PD小鼠模型,应用旷场实验、牵引实验、免疫组化染色、分析和W est ern bl ot检测手段,探讨姜黄素对多巴胺能神经元的保护作用及其发生机制,对将来实现姜黄素临床治疗PD提供可靠的实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组

5月龄雄性C57BL/6小鼠30只,体质量均约25 g,随机分成3组,对照组、模型组和姜黄素治疗组。对照组小鼠正常饮食;模型组小鼠腹腔注射M PTP(30 mg/kg)连续5 d,间隔24 h;治疗组小鼠连续5 d腹腔注射M PTP(30 mg/kg),随后连续7 d腹腔注射姜黄素(50 mg/kg)。

1.2 方法

1.2.1 行为学检测:旷场实验根据Teng等[1]的方法,观察水平运动力和垂直运动力2个指标。牵引实验根据W ang等[2]的方法记录牵引评分。

1.2.2 免疫组织化学染色:常规免疫组化染色实验方法。

1.2.3 体视学和光密度分析:每只小鼠取脑切片5张,光镜照相,i pp6.0软件分析切片上TH和DAT阳性纤维的光密度值和GFAP阳性的细胞数量,以每组50张切片的平均值作为各组的数据。

1.2.4 W est ern bl ot:常规W est ern bl ot实验方法。……

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