仇波，刘源，王勇

（中国医科大学附属第一医院神经外科，沈阳 110001）

近年来，脑外伤发生率明显增加。目前关于颅脑损伤的研究侧重于如何防治继发性脑损害，例如脑水肿、脑缺血缺氧、神经元凋亡等。人类海马区神经元与学习记忆紧密相关，且对脑外伤极为敏感，伤后神经元大量变性坏死，导致患者学习记忆功能障碍［1］。因此，研究脑损伤后海马神经元的凋亡与损伤机制具有重要意义。肿瘤坏死因子 α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）是一种具有广泛生物学活性的细胞因子，一般情况下适量TNF-α具有抗感染、抗病毒和抗肿瘤等作用［2］；也可通过多种机制作用于中枢神经系统，调节神经—内分泌功能、介质释放、抗原递呈等［3］。目前有研究表明TNF-α与脑损伤后的继发性缺血关系密切［4，5］，然而脑外伤后小鼠海马的TNF-α表达情况尚不清楚。本研究拟通过自由落体法复制闭合性脑外伤小鼠模型，探讨脑外伤后小鼠海马TNF-α的表达变化。

1 材料与方法

1.1 试剂和仪器

羊抗小鼠 TNF-α（Sigma公司），兔抗羊 IgG（北京中杉金桥生物技术有限公司），S-P免疫组化染色试剂盒与DAB显色试剂盒（福州迈新），高速离心机（上海医用分析仪器厂），OLYMPUS光学显微镜（Olympus公司），Image Pro Plus 6.0图像分析软件（Media Cybernetics公司）。

1.2 动物模型的建立及分组

Balb/c系雄性小鼠60只，体质量20～25 g，由中国医科大学实验动物中心提供。随机分为假手术组（30只）和脑外伤组（30只）。采用改良的自由落体法复制闭合性脑外伤小鼠模型，打击装置由脑立体定向仪、垂直导管、下落砝码、顶端涂有聚乙烯的撞针组成、撞针底端直……