郑旭锐 李长秦 季金文 王礼凤 孙守才 宋 健 王小平 肖新春 陕西中医学院（咸阳 712046）

加味四逆散是抗肝纤维化有效的中药复方，我们在前期的研究中已经证实其具有良好的抗肝纤维化作用［1－5］，为了进一步探讨其抗肝纤维化的机制，我们此次以肝星状细胞（HSC）为靶点，研究该方对HSC增殖的影响。

1 实验材料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 实验动物：雌性SD大鼠30只，清洁级，体重180g±20g，购自第四军医大学实验动物中心。动物合格证号：SCXK－（军）2007－007。

1.1.2 主要实验药物：加味四逆散：柴胡、枳壳、桃仁各10g，白芍20g，姜黄30g，丹参25g，黄芪40g。以上药物均购自陕西中医学院附属医院中药房，药物经加水浸泡，常规煎煮，过滤，水浴蒸发至3.12g／mL浓度的药液；复方鳖甲软肝片：0.5g／片，批号：20100808，用蒸馏水溶解至0.625g／mL。

1.1.3 动物细胞：HSC－T6（大鼠肝星状细胞）：购自上海肯强仪器有限公司，编号zy1002。

1.1.4 主要试剂：RPMI－1640干粉培养基（美国Gibco公司，按每10.4g 1640干粉培养基溶于900mL双蒸水，待其分溶解，加入青霉素100U／mL，硫酸链霉素I00U／mL，用1mol／L NaOH调节PH至7.1～7.4，定容至1000mL，采用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，分装后于4℃冰箱保存）；胰蛋白酶（美国Sigma，进口分装，浓度为1：250，即0.25%，用胰蛋白酶0.25g，PBS100mL，充分溶解，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，分装后于4℃冰箱保存。临用时用无菌的7.4%NaHCO3调节PH至7.2左右）；胎牛血清（FBS，郑州益康生物工程有限公司）；二甲基亚枫（DMSO，美国Sigma公司）；四甲基偶氮唑蓝（MTT，美国Sigma公司）

1.1.5 主要仪器：二氧化碳培养箱（德国Bind CB－150）；电子精密天平（BS124S型，北京赛多科斯仪器系统有限公司）；超低温冰箱（美国热电702型）；全自动酶标仪（美国Bio－Tek ELX808IU）。

1.2 实验方法 1.2.1 分组：将30只实验大鼠适应性喂养1周后随机分为5组：空白对照组；……