史飞涛，秦守杰，孔武明

(焦作市人民医院消化内科，河南 焦作 454002)

富含半胱氨酸61(cysteine-rich 61，Cry 61)是CCN家族成员，是一种分泌型的细胞外基质蛋白，属即刻早期反应基因产物，具有促进细胞粘附、迁移、增殖及血管生成的功能。近年研究发现Cyr 61与肿瘤发生密切相关［1-2］。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是重要的促血管生成因子，在肿瘤血管形成中起重要作用。笔者采用免疫组织化学技术对胃癌患者组织标本进行Cry 61和VEGF检测，探讨Cyr 61和VEGF与胃癌的关系，对两者的相关性进行分析，从而为胃癌的临床治疗及预后判断提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 材料 收集焦作市人民医院病理科2009～2010年手术切除的胃癌组织标本70例，其中男49例，女21例，年龄35～76岁，平均62.4岁。所有病例术前均未进行任何抗肿瘤治疗，术后均经病理检查确诊。另取20例距离肿瘤边缘不小于5 cm的正常组织作为对照。

1.2 主要试剂 兔抗人Cyr 61多克隆抗体、鼠抗人VEGF单克隆抗体购自Santa Cruze Biotech公司，免疫组化试剂盒及DAB显色剂购自武汉博士德公司。

1.3 实验方法 组织经甲醛固定，常规石蜡包埋，做4 μm厚连续切片，采用免疫组化SABC法检测Cyr 61、VEGF的表达情况。实验步骤严格按试剂盒说明书操作。石蜡切片脱蜡，以微波枸橼酸盐进行抗原修复，抗Cyr 61浓度为1∶200，VEGF抗体工作浓度为1∶100，DAB显色，苏木精复染，脱水，透明封片，显微镜下观察，用已知标准的Cyr 61和VEGF表达阳性的胃癌组织切片作为阳性对照;用磷酸盐缓冲液(PBS)代替I抗，作为阴性对照。

1.4 结果判定 采用双盲法，由两位有经验的病理科医师在不知道病理分级和临床资料的情况下读片。……