徐建明，何永忠，雷 鸣，吴文起，李 逊，黄锦昆，杨后猛，桂志明，钟 文，李 天，曾国华，李舒珏

(广州医学院港湾医院广东省泌尿外科重点实验室，广东 广州 510230)

当前的流行病学研究显示，前列腺癌在欧美国家的发病率明显高于我国，已经成为男性恶性肿瘤的第一位，而我国的前列腺癌的发病率也呈现出逐年上升的趋势[1]。前列腺特异抗原(PSA)是一种包含240个氨基酸的单链糖蛋白，分子量为34 kD。正常前列腺上皮、增生前列腺组织及前列腺癌细胞均能产生PSA。但在前列腺癌患者PSA水平明显高于良性前列腺增生患者及正常老年人。PSA在前列腺癌筛选、诊断、治疗方法的选择、疗效评估以及监测复发等方面已广为应用[2-3]。RNA干扰(RNA interference，RNAi)是指在多种生物细胞内，由双链RNA(double-stranded RNA，dsRNA)介导同源序列mRNA的特异性降解，而导致的基因沉默现象[4]。随着RNA干扰技术的兴起与发展，特异性地使某个基因在转录后沉默成为可能，因而成为前列腺癌基因治疗的又一新的有前途的靶向策略[5]。

我们采用RNA干扰技术阻断PSA基因表达，减少PSA的形成，降低其活性，研究PSA基因表达受抑制后对LNCaP细胞的生长、增殖及调亡的影响。

1 材料与方法

1.1 材料 人前列腺癌细胞株LNCaP由广东省泌尿外科重点实验室冻存；RPMI1640培养基和胎牛血清购自GIBCO公司；特异性干扰RNA由上海吉玛公司合成；TurboFect™ siRNATransfection Reagent购自Ferments公司；兔抗人PSA抗体购自EPITOMICS公司；四氮甲基唑蓝(MTT)购自Sigma公司。

1.2 细胞的冻存和培养 人雄激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞株由广东省泌尿外科重点实验室保存，10%胎牛血清的RPMI1640培养液，37℃、5%CO2培养箱内培养，取对数生长期的细胞实验。……