刘颖慰，周祥山，刘海峰,3，宋志伟，张元兴

1 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海 2002372 新加坡科技研究局生物过程技术研究所，新加坡 1386683 山东阿华生物药业有限公司，山东 东阿 252201

胞外唾液酸酶造成工程中国仓鼠卵巢细胞株所产人源重组促红素唾液酸含量降低

刘颖慰1，周祥山1，刘海峰1,3，宋志伟2，张元兴1

1 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237
2 新加坡科技研究局生物过程技术研究所，新加坡 138668
3 山东阿华生物药业有限公司，山东 东阿 252201

刘颖慰, 周祥山, 刘海峰, 等. 胞外唾液酸酶造成工程中国仓鼠卵巢细胞株所产人源重组促红素唾液酸含量降低. 生物工程学报, 2012, 28(12): 1492−1499.

Liu YW, Zhou XS, Liu HF, et al. Extracellular sialidase degrades sialic acid in recombinant human erythropoietin produced by an industrial Chinese hamster ovary cell strain. Chin J Biotech, 2012, 28(12): 1492−1499.

为了对工程中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞所产人源重组促红素 (rhEPO) 的N-糖基化特点进行考察，静置培养工程细胞后，通过等电聚焦和凝集素共沉淀对培养上清中的 rhEPO进行分析，并对无血清培养上清中乳酸脱氢酶 (LDH) 和唾液酸酶活性进行检测，发现这株CHO细胞可以表达唾液酸含量较高的rhEPO蛋白。但是随着培养时间的延长，细胞的存活率逐渐降低，死亡的细胞将胞内的唾液酸酶释放到胞外，唾液酸酶的降解作用会造成N-糖链分枝末端的唾液酸占有率降低，导致rhEPO蛋白糖基化形态的变化。所使用的方法及得到的结果为进一步对工业过程进行分析提供了参考。

中国仓鼠卵巢细胞株，人源重组促红素，N-糖基化，细胞活性，唾液酸酶

重组人促血红细胞生成素 (Recombinant human erythropoietin, rhEPO) 被用来治疗贫血，2009年在美国的销售额是63亿美元[1]。……